论文部分内容阅读
目的：生物—化疗是生物治疗与化疗相结合的方法，是目前恶性肿瘤综合治疗的新动向之一。应用基因治疗的方法来抑制肿瘤新生血管形成是一种较有前景的肿瘤治疗策略。可溶性VEGFR—2(sFlk-1)是质粒DNA载体编码的VEGFR-2胞外段。本实验采用鼠可溶性VEGFR-2重组质粒肌肉内注射接种肿瘤的小鼠，从而在小鼠体内持续产生游离型的VEGFR-2蛋白，通过与VEGF结合或与VEGFR形成无功能活性的异二聚体的方式抑制肿瘤新生血管的形成。同时联合使用化疗药物顺铂治疗BALB／c小鼠H22肝癌和Meth A纤维肉瘤以探讨抗肿瘤血管形成与化疗联合治疗肿瘤的可行性。 材料和方法：在6—8周龄的雌性BALB／c小鼠建立H22肝癌和Meth A纤维肉瘤实体瘤模型，小鼠腋下接种肿瘤细胞三天后，开始治疗。A组(生理盐水对照组)：生理盐水0.1ml／只，肌肉注射，每3天一次，连续4次；B组(化疗组)：化疗药物顺铂(2mg／Kg)0.1ml／只，腹腔内注射，每．周一次，连续两次；C组可溶性VEGFR-2重组质粒(1mg／ml)0.1ml／只，肌肉注射，每3天一次，连续4次:D组为B组与C组治疗的联合，其中可溶性VEGFR.2重组质粒于肿瘤接种后第3、6、9、12天注射，化疗于第4、11天注射。观察小鼠肿瘤大小，生存曲线，化疗毒副反应，并进行肿瘤组织形态学观察，免疫组织化学和肿瘤细胞凋亡分析。结果:可溶性vEGFR一2重组质粒(sFlk一1)与顺铂联合治疗H22肝癌和MethA纤维肉瘤产生了显著的抗肿瘤效果，联合组肿瘤明显小于对照组(P<0 .05)，同时联合组小鼠生存期显著长于对照组(P<0 .05)。肿瘤组织形态学观察显示联合治疗组肿瘤组织明显坏死，部分肿瘤细胞表现出凋亡，而对照组改变轻微。免疫组化显示联合组肿瘤组织中新生血管密度显著低于对照组，TUNEL法显示联合治疗组中肿瘤细胞凋亡率显著高于对照组。上述结果表明可溶性vEGFR一2重组质粒(sFlk一l)与顺铂联合治疗恶性肿瘤取得了协同抗肿瘤效应，分析其机制可能为二者的联合协同抑制肿瘤血管的生成，同时诱导肿瘤细胞的凋亡。结论:该项研究初步表明使用可溶性VEGFR一2重组质粒抑制肿瘤新生血管形成并联合化疗治疗恶性肿瘤具有可行性。