量子点/脂质体荧光传感器的制备及应用研究

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荧光传感器具有选择性好、灵敏度高、简单易行、成本低等优点,被广泛用于生物医学研究中。量子点(QDs)具有众多独特的光物理特性,如宽谱带吸收、窄谱带发射、发射峰连续可调以及抗光漂白性等,作为一种新型荧光团成为了近年来生物医学领域中研究的热点。通过对量子点进行脂质体包覆,量子点荧光传感器的荧光稳定性、抗环境干扰能力和生物相容性得到了很大的提升,并且脂质体表面易于进行更复杂的表面组装和修饰,进一步扩展了量子点荧光传感器在生物分析领域中的应用。本论文研究了双色量子/脂质体荧光传感器的设计及制备方法,利用能量转移的原理,实现了对microRNA-21的比率荧光检测。论文的主要研究内容如下:1.基于薄膜分散超声法制备了脂质体空泡,实现了对脂质体尺寸的控制,并通过加入带有羧基的磷脂使脂质体表面带有羧基官能团,为下一步量子点/脂质体的构建奠定了良好的基础。2.利用薄膜分散超声法制备了同时包覆有绿色油溶量子点和红色水溶量子点的脂质体,脂质体尺寸约为80 nm。红色量子点包覆于脂质体内腔中,绿色量子点包覆于磷脂双层中。该双色量子点/脂质体保持了 QDs优良的光学性能,提高了抗环境干扰能力,为下一步荧光传感器的构建奠定了良好的基础。3.双色量子点/脂质体耦合capture DNA探针,进一步杂交结合纳米金(淬灭剂)修饰的短链DNA,构建了一种新型的纳米荧光传感器。纳米金通过能量转移过程,猝灭外层绿色量子点荧光,而内层红色量子点荧光保持不变。目标microRNA-21存在条件下,capture DNA与目标microRNA-21及纳米金修饰的短链DNA间存在竞争反应,纳米金粒子脱离双色量子点/脂质体表面,绿色量子点与纳米金之间的能量转移消失,其荧光逐渐增强,而内层红色量子点的荧光保持不变,从而实现了目标microRNA-21的比率荧光检测,呈现出良好的可视化效果。
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