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目的:唾液腺腺样囊性癌(Salivary gland adenoid cystic carcinoma,ACC)侵袭性强,易发生远处转移。本研究的目的为探究体外条件下ACC来源的癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAF)的生物学特性,及其对ACC细胞侵袭的影响。方法:本研究通过HE染色方法,对两例ACC组织进行病理诊断;免疫组织化学染色的方法检测ACC组织间质中α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。对这两个新鲜ACC组织中提取的原代细胞进行培养和纯化,并通过细胞免疫荧光染色的方法检测原代细胞中广谱细胞角蛋白(pan-cytokeratin,CK)、波形蛋白(vimentin,VIM)、α-SMA、成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activated protein,FAP)、成纤维特异性蛋白1(fibroblast specific protein 1,FSP-1)的表达情况。细胞划痕实验考察CAF细胞的迁移能力。Transwell小室细胞侵袭实验模型和微流控芯片模型考察CAF的侵袭能力。收集CAF的条件培养液(conditional medium,CM),通过细胞划痕实验和Transwell小室细胞侵袭实验考察CAF对ACC细胞迁移和侵袭能力的影响。通过微流控芯片模型,研究ACC细胞与CAF侵袭时的相互作用关系。通过抑制基质金属蛋白酶和干扰CXCL12/CXCR4信号通路来考查CAF对ACC侵袭的抑制作用。结果:观察HE染色切片,两例病例组织均为ACC,免疫组织化学染色结果表明α-SMA在ACC组织的间质中表达阳性。细胞免疫荧光染色方法鉴定从ACC组织中提取的原代CAF,结果显示这些细胞CK表达阴性,VIM表达阳性,几乎所有的细胞都表达FAP和FSP-1,大部分细胞表达α-SMA,提示我们提取这些原代细胞表达典型的CAF生物学标记物。传统的细胞划痕实验、Transwell小室细胞迁移实验以及Transwell小室细胞侵袭实验均显示CAF与正常牙龈成纤维细胞相比,其迁移能力和在垂直方向上的侵袭能力更强;微流控芯片的实验结果表明CAF在水平方向上也具有较强的侵袭能力。并且,与空白对照组相比较,CAF可以促进ACC细胞系SACC-LM和SACC-83细胞的迁移、侵袭。将SACC-LM和SACC-83细胞与CAF在微流控芯片平台上共培养,我们发现CAF总是位于侵袭通道的前沿,SACC-LM和SACC-83细胞沿着CAF在基质胶中建立的侵袭通道向前移动。而SACC-LM和SACC-83细胞与正常牙龈成纤维细胞共培养时,SACC-LM和SACC-83细胞位于侵袭的前沿。经过统计学分析发现,SACC-LM和SACC-83细胞与CAF共培养时,ACC细胞侵袭到基质胶中的面积更大,差别具有统计学意义。CAF促进ACC侵袭的抑制实验显示,GM6001完全抑制ACC和CAF细胞侵袭入基质胶内;AMD3100可以抑制SACC-LM和SACC-83细胞的侵袭,特别是SACC-LM和SACC-83没有沿着CAF建立的通道向前侵袭。结论:1.ACC来源的CAF不仅表达CAF典型的生物学标志物,而且能够促进ACC细胞的迁移、侵袭。2.CAF促进ACC侵袭的机制可能为,CAF首先在ECM中建立侵袭通道,然后CAF通过分泌CXCL12诱导ACC细胞尾随其后。