淫羊藿总黄酮(EF)延缓人胚肺二倍体成纤维细胞衰老的机制研究

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[目的]探讨淫羊藿总黄酮(EF)延缓人胚肺二倍体成纤维细胞衰老的机制.[方法]采用含EF的血清对人二倍体成纤维细胞2BS细胞株进行处理,观察2BS细胞寿命实验;采用荧光实时定量PCR法检测p16基因mRNA的表达;ELISA法检测细胞总Rb蛋白和磷酸化RB蛋白的含量;TRAP-Hyb单管一步法检测细胞端粒酶活性;端粒限制性片段(TRF)Southern blot法检测2BS细胞端粒长度变化.[结果]淫羊藿总黄酮(EF)能够延长2BS细胞的传代寿命;下调2BS细胞p16基因mRNA的表达;增加磷酸化Rb蛋白的含量;延缓衰老细胞端粒长度的缩短,而不是激活细胞端粒酶活性.[结论]2BS细胞衰老时,p16基因mRNA的表达增加,磷酸化Rb蛋白含量减少,细胞端粒长度缩短;淫羊藿总黄酮(EF)可能通过抑制p16基因表达,促进磷酸化Rb蛋白的产生,从而延缓衰老细胞端粒长度的缩短,具有延缓细胞衰老的作用,而不是通过激活细胞端粒酶的活性.
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