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本课题通过比较几种诱变方法的优缺点,选出一种最优的诱变方法——0.5%EMS处理2h+UV照射30s,在分析已有林可链霉菌的代谢途径的基础上,发现丙基脯氨酸和谷氨酰胺是林可霉素合成途径中的关键物质,通过查阅文献找到这两种物质的结构类似物,以该两种结构类似物作为复合诱变后的筛选物质。实验中以林可链霉菌07-5为出发菌株,经过三次EMS+UV复合诱变,依次以丙基脯氨酸和谷氨酰胺的结构类似物为筛选物质,定向筛选出具有该两种物质抗性的突变株P2-A6-P10-10,其产量较出发菌株提高了45%。在突变株和出发菌株的发酵过程中,分别在发酵开始时和144h时添加0.06%和0.005%的丙基脯氨酸的结构类似物,产量分别提高了13.7%和13.8%；分别在144h时和发酵开始时添加0.04%的谷氨酰胺,产量分别提高了14.1%和17.3%。突变株经三周保藏和传代实验,菌株高产且稳定。在林可链霉菌发酵产林可霉素的过程中,在不同时间点添加一定量的丙氨酸和三甲胺可以发现,林可霉素的产量提高了25%,通过测定林可霉素合成过程中的一些关键酶的酶活及关键代谢产物的含量,发现,在发酵开始时添加0.01%的丙氨酸,可抑制糖酵解途径中的丙酮酸激酶的酶活,从而使菌体中积累高浓度的磷酸烯醇式丙酮酸,而在发酵24h时添加0.02%的三甲胺,可以抑制莽草酸途径中邻氨基苯甲酸合成酶的酶活,从而使菌体内积累高浓度的酪氨酸,进而提高林可霉素的产量。将经诱变筛选得到的突变株P2-A6-P10-10和出发菌株07-5在50L罐上进行发酵,通过工艺上的改进,实现了其产量较出发菌株26.7%的提高。通过测定发酵过程中的各个指标,发现突变株较出发菌株的生长代谢和合成代谢要更加旺盛。