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2006年6月以来,安徽省部分地区及周边省市猪暴发了以发热、厌食、眼结膜炎等为主要症状,以高热、高发病率、高死亡率为主要特征的猪急性传染病,即所谓的“猪高热病”。通过血清学和分子生物学检测表明,发病猪多为双重或三重以上感染,常见的混合感染病原为猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、圆环病毒2型、伪狂犬病、链球菌等。病因调查结果显示,这次“猪高热病”流行是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）变异株引起高致病性蓝耳病。为追溯“猪高热病”猪群中PRRSV流行毒株的来源和变异原因,探索“猪高热病”预防与控制措施,本研究对2007～2008年间分离的PRRSV流行毒株进行了鉴定、主要基因序列测定、致病性试验,分析了我省PRRSV流行株与国内外已发表的其它毒株间的遗传变异关系。研究结果为探索我省“高热病”猪群中PRRSV流行株的来源、分子流行病学和变异情况等提供科学依据,为“猪高热病”的诊断和防制奠定理论基础。1.将采自舒城、定远、肥西、宿州、黄山等县市的不同猪场持续发热的60份发病猪的肺脏、脾和淋巴结等组织病料用RT-PCR进行PRRSV检测,筛选阳性样品经处理后接种到Marc-145细胞,能产生明显的细胞病变,电镜观察可见直径50-80nm的有囊膜病毒粒子,与美洲型PRRSV阳性血清进行间接免疫荧光试验可见特征性荧光;RT-PCR检测可见目的条带,证实分离的5株病毒为PRRSV,分别命名SCH07、DY07、FX07、SZH08、HSH08。2.对5株PRRSV的Nsp2高变区和ORF5测定和序列分析结果表明,所有分离株的Nsp2都发生30个氨基酸的不连续缺失,缺失位置与JXA1株完全一致;5株流行株之间Nsp2基因高变区核苷酸同源性在97.1%～98.7%之间,ORF5全基因的核苷酸同源性在96.9%～99.7%之间。根据Nsp2基因高变区、ORF5全基因的核苷酸同源性,与2006年后的新分离株尤其是HuB1株同源性最高,核苷酸同源性分别在96.8%以上。根据Nsp2基因高变区、ORF5全基因所建立的遗传系统发育树可知这5株PRRSV流行株之间的亲缘关系很近,与江西、湖北等2省的PRRSV流行株由同一毒株演化而来,同属美洲型。3.选取SCH07毒株的第15代细胞培养物经Reed-Muench法测定毒价为10-4.7 TCID50/0.1mL。按5mL/头经口、鼻接种PRRSV抗原与抗体均为阴性的健康猪2头,并设阴性对照组。通过测量体温、临床症状、大体病变、病理切片观察、RT-PCR、ELISA抗体检测等方法分析其病毒致病性。结果表明:接种病毒猪出现高热、呼吸障碍等典型“猪高热病”的临床症状,试验猪剖检均出现以心叶、尖叶为主的灶性暗红色实变为特征的肺脏病变;病理切片显示了间质性肺炎等符合猪繁殖与呼吸综合征的病理变化,RT-PCR、ELISA抗体检测均为阳性。证实了分离的病毒为PRRSV变异株,其中接毒组有一头猪死亡,说明PRRSV变异株的致病力增强。也佐证了PRRSV变异株是“猪高热病”的主要病原之一。