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目的: 构建三个Smurf1 shRNA真核表达重组质粒；探讨其对转化生长因子beta1（TGF-beta1）诱导的人肾小管近端上皮细胞（HK-2）转分化（EMT）过程中E-Cadherin及alpha-SMA表达的影响，并筛选出一个最有效干扰质粒。
方法: 将针对人Smurf1设计的采用体外转录生物合成的特异性短发夹RNA（shRNA）双链分子用脂质体转染的方法导入体外培养有和无TGF-beta1（10ug/L）刺激的HK-2。经过G418压力性筛选后，免疫蛋白印迹检测E-Cadherin及alpha-SMA在蛋白水平上的表达变化。将重组质粒命名为pSilencer-S1、pSilencer-S2、pSilencer-S3。
结果: pSilencer-S1、pSilencer-S2、pSilencer-S3 三个重组子均构建成功；TGF-beta1刺激后，HK-2细胞中E-Cadherin表达下调及alpha-SMA表达上调；脂质体转染质粒pSilencer-S1、pSilencer-S2、pSilencer-S3可抑制alpha-SMA表达，恢复E-Cadherin表达，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。其中，以pSilencer S1抑制效果最明显（P<0.05）。
结论: 在TGF-beta1诱导HK-2细胞转分化进程中alpha-SMA表达上调及E-Cadherin表达下调；基因转染恢复E-Cadherin表达及抑制alpha-SMA表达，可部分减轻EMT程度。