论文部分内容阅读
目的从理论研究的角度总结绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制,从临床研究的角度探索PMOP患者基质gla蛋白(MGP)与骨代谢的关系及胎球蛋白A-基质gla蛋白-钙磷矿化复合物(FMC)参与PMOP的发病机制,并观察中药淫羊藿胶囊治疗PMOP患者(肾阳亏虚证)的临床疗效和作用机制。方法1、理论研究:查阅文献,总结PMOP的发病机制,分析骨矿化异常与PMOP之间的关系;对古今相关文献进行系统的回顾总结,以了解中医对PMOP的病因病机及治则治法的认识,为临床试验研究提供理论依据。2、血清基质gla蛋白与骨代谢的相关性:本研究录入120例PMOP患者和60例骨量正常的绝经后妇女。通过聚合酶链式反应(PCR)检测血清MGP m RNA水平,骨状态通过骨密度(BMD)和骨转换标志物(β-CTX,P1NP)评估。此外,也检测血清雌二醇(E2)、甲状旁腺素(PTH)、血钙(Ca)、血磷(P)水平。3、胎球蛋白A-基质gla蛋白-钙磷复合体(FMC)参与PMOP的机制研究:选取行腰椎手术的PMOP患者和骨量正常的绝经后女性各23例,在手术时取其部分腰椎骨组织,患者血清胎球蛋白A(fetuin A)、基质gla蛋白(MGP)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、runt相关转录因子2(RUNX2)水平采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,骨组织局部fetuin A、MGP、BMP2、RUNX2 m RNA及蛋白的表达则分别通过PCR及免疫组化的方法检测。4、中药疗效研究:选取PMOP患者90例,将其随机双盲分为A组(安慰剂对照组)、B组(淫羊藿胶囊低剂量组)及C组(淫羊藿胶囊高剂量组),共治疗24周。于治疗前和治疗24周后,观测患者疼痛VAS评分、主要症候评分、中医证候积分疗效变化,并检测患者BMD、血清中PINP、β-CTX及血清Fetuin-A、MGP水平的变化。统计学的处理:数据的分析处理采用统计软件SPSS 20.0进行,所有的数据都用均数±标准差(x±s)的形式表示,统计结果出现P<0.05则认为差异具有统计学的意义。结果1、查阅文献,研究表明骨矿化异常是OP/PMOP的发病原因之一,FMC的形成是维持正常骨矿化的重要机制,但FMC是如何参与OP/PMOP发病的尚不清楚;中医学认为OP/PMOP的发病关键在于多种原因导致的肾虚髓亏,还与脾胃虚弱、肝血不足、瘀血阻滞有关。此外,我的导师向楠教授痰浊也是OP发病的重要因素。因此中医药治疗OP/PMOP也以补肾为基础,补肾中药是否能够通过影响骨矿化从而改善OP/PMOP的临床症状有待研究。2、PMOP组与非骨质疏松组相比,BMD、MGP m RNA、β-CTX、P1NP的差异有统计学意义(P<0.05)。PMOP患者血清MGP m RNA水平显著低于对照组(0.835±0.415 VS 4.524±0.769,P<0.001),与BMD(r=0.376,P<0.001)、E2(r=0.227,P=0.013)呈正相关。未发现MGPm RNA与年龄、身高、体重、PTH、Ca、P、β-CTX,P1NP有明显相关性。在骨量正常的绝经后妇女中,在MGP m RNA与其他参数之间没有发现明显的相关性。3、PMOP组血清Fetuin-A、MGP、腰椎BMP2、Runx2 m RNA表达明显低于非骨质疏松组,而腰椎MGPm RNA表达高于非骨质疏松组(P<0.05);两组间比较,血清BMP2、RUNX2水平、腰椎Fetuin-A m RNA表达没有明显的差异(P>0.05)。多元逻辑回归分析显示,腰椎MGP、BMP2及RUNX2 m RNA表达与BMD相关(分别是OR 1.016,95%CI0.809-0.991,P=0.029;OR1.230,95%CI1.063-1.424,P=0.015;OR 1.107,95%CI1.016-1.205,P=0.048)。免疫组织化学结果显示,骨小梁周边的成骨细胞及骨髓基质细胞胞浆均可见Fetuin-A、BMP2、RUNX2、MGP的阳性表达,骨小梁周边的破骨细胞还可见到MGP的阳性表达。与非骨质疏松组相比,PMOP组MGP的光密度值水平较高(P<0.05)而BMP2和RUNX2水平较低(P<0.05或P<0.01);两组间比较,Fetuin-A光密度值水平差异不明显(P>0.05);4、同治疗前相对比,B、C两组都能有效改善患者的临床症状、增加患者腰椎及股骨颈的骨密度、提高血清Fetuin-A及MGP的水平(P<0.05),对骨代谢标志物影响不明显(P>0.05);其中C组能更快缓解疼痛,且对腰椎骨密度的升高效果更为显著(P<0.01)。与治疗前比较,A组对各项指标影响均不显著(P>0.05)。结论1、临床与试验研究提示,MGP与PMOP有一定的相关性,而FMC很可能通过影响骨矿化从而影响PMOP的发病;补肾中药治疗PMOP有中医的理论基础,也有现代试验研究的支持。2、低血清MGP m RNA水平可能与PMOP的发病有关,而雌激素参与对血清MGP的调控。3、血清FMC的合成减少及MGP在局部骨组织聚集,可能通过影响BMP2/Smad/Runx2信号通路,抑制正常的骨矿化,从而影响PMOP的发生。4、中药淫羊藿能够改善PMOP肾阳亏虚证患者的临床症状,增加BMD,并且其效果跟用药剂量呈相关,其作用机制可能与增加血清FMC的合成有关。