SQLE调控ERK通路影响肺鳞癌细胞生长的机制

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzwyy198552
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  目前,肺癌的发病率位于全球癌症的首位,我国肺癌的死亡率增加趋势明显,已经成为第一位的癌症死因。其中肺鳞癌约占肺癌的30%,早期可无明显症状,因此生物标志物在肺鳞癌的早发现、早诊断、早治疗中占据重要地位。前期多项研究表明肿瘤的发生发展与胆固醇代谢之间具有密切的关联。鲨烯环氧化酶(SQLE)存在于内质网,是胆固醇生物合成氧化反应第一步的关键限速酶之一。之前的研究发现,SQLE与肝癌、乳腺癌、结直肠癌、膀胱癌等多种肿瘤的发生及发展具有密切的关系。前期有研究报道肺鳞癌组织中SQLE的表达水平明显高于癌旁组织,且通过对患者生存期及SQLE表达水平分析,肺癌预后与该基因具有一定相关性,但是关于SQLE促进肺鳞癌发生发展的机制尚未明确。本实验应用生物信息技术分析SQLE对患者预后的影响并探索其促进肺鳞癌细胞增殖的作用机制。  方法:  应用基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus简称GEO)分析比较肺鳞癌及其癌旁组织基因表达差异。然后应用Oncomine在线数据库比较SQLE在肺腺癌、肺鳞癌、肺小细胞癌及肺良性肿瘤中的表达差异。然后应用Kaplan-Meier生存曲线分析SQLE表达水平与肺鳞癌患者生存期之间的关系。利用阳离子脂质体转染法将si-RNA转染至肺鳞癌细胞H520中以沉默SQLE的表达。应用Trizol法和RIPA细胞裂解液分别提取转染后H520细胞中的总RNA和总蛋白质,然后利用RT-PCR和Western-blot技术从RNA及蛋白水平分别检测SQLEm RNA及p-ERK1/2蛋白的表达水平。同时,MTT法检测转染后的肺鳞癌细胞的生长情况。  结果:  通过GEO数据库进行分析发现了342个差异表达的基因,其中上调基因占186个,下调基因占156个。其中,相比较于癌旁组织,SQLE在肺鳞癌中明显高表达。利用Oncomine软件比较显示,肺鳞癌组织中SQLE的表达水平明显高于肺腺癌、肺小细胞癌及肺良性肿瘤;且肺鳞癌组织中SQLE的表达水平明显较癌旁组织高,p<0.05,差异具有统计学意义。利用Kaplan-Meier生存曲线分析发现,肺鳞癌患者SQLE越是高表达,其生存期越短,P<0.05,差异具有统计学意义。因此,有望将SQLE作为早期诊断及判断预后的生物标志物之一。应用MTT法检测细胞增殖情况,发现si-SQLE1640组下调SQLE后的NCI-H520细胞系增殖明显比正常组下降(p<0.001,差异具有统计学意义)。下调组的细胞中p-ERK1/2的表达明显较正常组降低。  结论:  1.SQLE在肺鳞癌中高表达,是患者预后不良的因素之一。  2.SQLE可通过对ERK通路的影响促进癌细胞增殖。
其他文献
镁(magnesium,Mg2+)是机体中一种具有重要功能的元素。研究表明,Mg2+在调节血管平滑肌细胞和内皮细胞功能方面具有至关重要作用。Mg2+通过对血管平滑肌细胞Ca2+通道和激动剂-
目的:回顾性分析北京地区心房颤动(Atrial Fibrillation,AF)合并冠心病患者行经皮冠状动脉介入(Percutaneous Coronary Intervention,PCI)术后的出院心率状况,探讨目前此类患
扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsley)是我国近年发现的一种检疫性害虫,也是新疆入侵有害生物之一。新疆的地理位置、气候条件以及植被资源有利于扶桑绵粉蚧的发生、蔓
目的:通过随机分组比较非小细胞肺癌脑转移患者调强放射治疗(Intensity modulated radiotheraphy,IMRT)的剂量学相关参数、近期疗效及毒副反应等,探讨非小细胞肺癌脑转移IMRT治疗