变应性因素对慢性鼻—鼻窦炎的细菌生物膜表达的影响及相关性研究

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目的:在扫描电镜下观察变应性鼻-鼻窦炎患者与非变应性鼻-鼻窦炎患者鼻粘膜表面细菌生物膜形成情况、形态学特征,初步探讨变应性因素对慢性鼻-鼻窦炎细菌生物膜表达情况的影响,并观察慢性鼻-鼻窦炎患者鼻粘膜表面的杯状细胞密度,探讨杯状细胞与细菌生物膜生长的相关性,为临床预防及治疗慢性鼻-鼻窦炎提供理论依据。方法:研究对象为2012年6月至9月期间在河北医科大学第三医院耳鼻喉科行鼻内镜下鼻窦开放术的24例慢性鼻-鼻窦炎患者,详细记录患者的年龄、性别、症状和体征,所有患者均行过敏原检测、鼻窦CT检查、Lund-Mackay鼻窦CT评分及视觉模拟量表(visual analog scale,VA S)症状评分。根据患者是否存在变应性因素将其分为:变应性鼻-鼻窦炎组和非变应性鼻-鼻窦炎组。所有患者均在鼻内镜手术中留取钩突、筛泡或上颌窦口黏膜作为标本,经常规扫描电镜样品制备法处理后,在扫描电镜下观察,通过对比文献中的上百张细菌生物膜图片,判断标本中是否存在细菌生物膜,并描述细菌生物膜的形成情况及形态特征,分析变应性鼻-鼻窦炎组与非变应性鼻-鼻窦炎组之间的差异。并对标本进行常规石蜡切片、阿利新蓝-过碘酸-希夫(AB-PAS)染色,计数杯状细胞数,分析变应性鼻-鼻窦炎组与非变应性鼻-鼻窦炎组之间的差异,对变应性因素的存在与否和部分临床指标进行相关性分析。各组实验数据采用SPSS13.0软件包进行统计学分析,计量资料用均数±标准差表示,采用t检验法比较,两组间观察到细菌生物膜的差异采用四格表资料的Fisher确切概率法比较,p<0.05为差异有统计学意义。结果:124例慢性鼻-鼻窦炎患者中,10例(41.67%)患者为变应性鼻-鼻窦炎,14例(58.33%)患者为非变应性鼻-鼻窦炎。2扫描电镜下观察细菌生物膜的阳性结果。24例CRS患者的鼻粘膜样本经扫描电子显微镜检查发现18例样本存在不同形态的BBF,阳性率为75.0%,其中10例变应性鼻-鼻窦炎患者中10例均发现BBF,阳性率为100%,14例非变应性鼻-鼻窦炎患者中,8例发现BBF,阳性率为57.1%,经统计学分析,p<0.05,认为两组患者细菌生物膜阳性率有差异。3扫描电镜下观察到的鼻粘膜损伤及细菌生物膜形态。所有样本均观察到粘膜表面纤毛存在不同程度的紊乱、倒伏,甚至缺失,细菌生物膜阴性患者纤毛损伤程度较轻。细菌生物膜阳性患者粘膜表面大量粘液性基质。18例慢性鼻-鼻窦炎患者粘膜表面发现了典型的细菌生物膜,具有水通道及多个微菌落结合在一起形成的特征性的三维立体结构。这些样本包含了细菌生物膜生命周期的不同阶段。4两组间临床症状的VAS评分及鼻窦CT的Lund-Mackay评分比较。变应性鼻-鼻窦炎组与非变应性鼻-鼻窦炎组VAS评分均数分别为21.40±8.70和20.79±6.27,经t检验法比较,p>0.05,可认为两组患者VAS评分无差异,变应性鼻-鼻窦炎组与非变应性鼻-鼻窦炎组鼻窦CT的Lund-Mackay评分均数分别为12.60±5.12和10.07±3.95,经t检验法比较,p>0.05,可认为两组患者鼻窦CT的Lund-Mackay评分无差异。5两组间粘膜上皮杯状细胞数量比较。变应性鼻-鼻窦炎组与非变应性鼻-鼻窦炎组杯状细胞数量均数分别为27.40±2.32和16.43±1.93,经t检验法比较,p<0.01,认为两组患者粘膜上皮杯状细胞数量有差异。结论:变应性因素组细菌生物膜的阳性率高于非变应性因素组,两者间差异具有统计学意义,由此推测,变应性因素的存在与细菌生物膜形成密切相关,变应性因素可能是慢性鼻-鼻窦炎细菌生物膜形成的危险因素之一。变应性鼻-鼻窦炎组杯状细胞数量高于非变应性鼻-鼻窦炎组,两组间差异有统计学意义,因杯状细胞为粘膜上皮的主要分泌细胞,且扫描电镜下发现细菌生物膜阳性患者粘膜表面有较多粘液性基质,由此推测,杯状细胞分泌的粘液性基质(主要为粘蛋白)可能为细菌生物膜提供了生长所需的营养,因此,存在变应性因素的患者细菌生物膜阳性表达率高。另外,在慢性鼻-鼻窦炎患者中,变应性因素的存在与否和VAS评分及鼻窦CT评分无关。
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