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人参(Panax ginseng C.A.Mey)、西洋参(P.quinquefolius L.)、三七(P.notoginseng(Burk.)F.H.chen)三种是人参属代表性药用植物,具有较高的药用价值和经济价值,受到研究学者的高度重视。然而,目前有关三者的研究工作多集中在栽培、生理、药理药化等方面,而对其遗传特性方面的研究相对较少,从而制约了一些分子生物技术在人参属药用植物中的应用。本文以三种人参属药用植物不同分生组织为试材,优化了各物种材料的染色体制片技术,以PCR法筛选到的rDNA序列为探针,对三种人参属药用植物进行双色荧光原位杂交,并分析其核型和亲缘关系。主要研究结果如下:1.通过对人参属药用植物不同材料染色体制片的影响因素进行对比研究,优化了不同材料染色体制片技术。结果表明:染色体制片取材是关键,组培苗根尖长至2cm,种子根尖长至1.5cm,参苗根尖长至1cm,愈伤组织继代后6-9d时,取材适宜。三种根尖经0℃冰水预处理10-15h或2mmol/L 8-羟基喹啉预处理2-6h,染色体形态清晰,愈伤组织0℃放置24h,染色体聚缩程度适中。37℃水浴条件下,组培苗根尖和参苗根尖经2%纤维素酶+1%果胶酶酶解90min,种子根尖和愈伤组织酶解120min酶解程度高,染色体分散且背景干净。染色方法采用卡宝品红染液和45%醋酸较好。本试验条件下,种子根尖适合采用滴片法制片,其他材料适合采用压片法。2.本文采用PCR法筛选人参属药用植物rDNA探针,对人参、西洋参、三七进行荧光原位杂交,完善了人参属药用植物荧光原位杂交技术。结果表明:筛选到的8种rDNA探针,其中高度保守的p18S、p45S1、p45S2探针在三个物种染色体上各有一对杂交位点,p5S1探针在人参、西洋参染色体上各有两对杂交位点,p5S2探针在人参、西洋参染色体上各有一对杂交位点,p5S3、p5S5探针在人参、西洋参染色体上各有两对杂交位点,在三七染色体上有一对杂交位点,p5S4探针在西洋参染色体上有一对杂交位点。3.本文采用杂交信号好、杂交位点多的探针,对三种人参属药用植物进行双色荧光原位杂交,结合染色体特征参数和rDNA分布位点,分析了人参、西洋参、三七核型及物种间亲缘关系。结果表明:人参染色体核型公式为2n=48=30m+14sm+2st+2T,p18S探针在人参第1对染色体随体上有一对清晰的杂交位点,p5S1探针有两对杂交信号,一对信号较强,位于第14对染色体短臂靠近着丝粒位置,一对信号较弱,位于第3对染色体长臂紧挨着丝粒位置;西洋参染色体核型公式为2n=48=22m+22sm+2st+2T,p18S探针在西洋参第五对染色体短臂上有一对清晰的杂交位点,p5S3探针有两对杂交信号,一对信号较强,位于第9对染色体短臂靠近着丝粒位置,一对信号较弱,位于第6对染色体长臂紧挨着丝粒位置;三七染色体核型公式为2n=24=20m+4sm,p18S探针在三七第1对染色体短臂中间位置有一对信号较强杂交位点,p5S3探针在第11对染色体短臂中间位置有一对信号较弱杂交位点。核型似近系数聚类分析及rDNA分布位点特征表明,人参与西洋参亲缘关系较近,三七与二者亲缘关系较远。