目的:初步了解重庆地区耳鼻喉科(ENT)门诊鼻炎/鼻窦炎患儿常见呼吸道病毒感染流行趋势,明确新发现呼吸道病毒博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(hMPV)在上呼吸道感染(URTI)中可能的作用与意义,为进一步明确上下呼吸道感染病毒病原体的异同提供帮助。通过分类计数鼻腔灌洗液(NWF)细胞成分,分析病毒感染与嗜酸性粒细胞计数的相关性,为进一步探讨病毒感染诱发喘息的机制提供理论依据。方法:1.采取每周一固定一天收集标本的方式,收集2007年12月～2008年11月前来重庆医科大学附属儿童医院耳鼻喉科门诊就诊患儿鼻腔灌洗液标本。2. DNA病毒检测:用PCR技术检测标本中DNA病毒。标本收集后,取200μl用QIAamp ? DNA Mini Kit (QIAGEN Inc,USA)提取病毒基因组DNA,提取的DNA用于病毒基因核酸片断的扩增。3. RNA病毒检测:用RT-PCR技术检测标本中RNA病毒。标本收集后,取200μl上清用QIAamp ? RNA Mini Kit (QIAGEN Inc,USA)提取病毒基因组RNA,提取的RNA经过反转录后用于病毒基因核酸片断的扩增。4.细胞分类计数:将NWF标本分为病毒检测阳性组和病毒检测阴性组,采用瑞氏染色,在油镜下进行细胞分类计数,嗜酸性粒细胞百分率用均数±标准差表示。使用SPSS16.0软件对两组的嗜酸性粒细胞数进行正态性检验和独立样本t检验。结果:1.一般情况:从2007年12月至2008年11月每周一固定时间收集标本,共收集耳鼻喉科门诊鼻炎/鼻窦炎患儿363例,其中细胞总数>1×105/ml的鼻腔灌洗液标本95例。男56例,女39例;年龄1.6岁～15岁,平均年龄78.2±38.4月;诊断鼻窦炎46例、鼻炎37例(其中包括2个鼻炎合并鼻异物)、过敏性鼻炎6例、过敏性鼻炎合并鼻窦炎3例、鼻息肉3例。2.病毒检测率及其构成比:95例患儿中30例检出病毒阳性,阳性率为31.58%,其中:单一病毒感染的25例,占病毒检出阳性标本的83.33%;两种病毒混合感染5例,占16.67%。单一感染以博卡病毒(HBoV)、腺病毒(AdV)、鼻病毒(RhV)、A型流感病毒(IFV-A)的检出率最高,分别占病毒阳性标本的23.3%(7/30)、20%(6/30)、10%(3/30)、10%(3/30),其次为呼吸道合胞病毒(RSV)6.7%(2/30),副流感病毒1型(PIV-1)、副流感病毒3型(PIV-3)、冠状病毒OC43(CoV-OC43)、hMPV各3.3%(1/30),未检测出B型流感病毒。混合感染均为腺病毒、鼻病毒与其他病毒感染,分别为AdV+hMPV, AdV+PIV-1, RhV+RSV,RhV+HBoV, RhV+AdV。95例患儿中男性16例,阳性率为28.6%(16/56);女14例,阳性率为35.9%(14/39)。男女之间无统计学差异。<3岁的有11例,检出阳性的有4例,3～6岁的有33例,检出阳性的有10例,6～12岁的有47例,检出阳性的有16例,≥12岁的有4例,未检出阳性标本。检出病毒阳性的各年龄段检出率无统计学差异。冬春季病毒阳性率为42.86%(12/28),夏秋季病毒阳性率为26.87%(18/67)。冬春季与夏秋季比较无统计学差异。病毒检测阳性30例患儿中,14例诊断为鼻窦炎(30.4%);12例诊断为鼻炎(32.4%);2例诊断过敏性鼻炎(33.3%);2例诊断为过敏性鼻炎合并鼻窦炎(66.7%);鼻息肉未检测出病毒阳性。3.新发现呼吸道病毒类型及临床特征:新发现呼吸道病毒博卡病毒的检出率较高,有8例,病毒检测阳性率为8.42%,仅次于腺病毒,居本研究病毒感染率的第二位。其中1例为与鼻病毒混合感染。博卡病毒平均感染年龄为62.8±20.5月。男性5例,女性3例。其冬春季检出5例,夏秋季检出3例。2例偏肺病毒分别是在2月份和5月份检测到的,男女各1例,年龄分别为10岁10月和2岁。4.鼻腔灌洗液嗜酸性粒细胞百分率:病毒检测阳性组的嗜酸性粒细胞百分率为7.6±6.3%,病毒检测阴性组的嗜酸性粒细胞百分率为4.2±5.2%,病毒阳性组的嗜酸性粒细胞数明显高于病毒阴性组(P<0.05);中性粒细胞与淋巴细胞计数两组比较无差异。结论:本研究结果显示:鼻炎/鼻窦炎患儿NWF中除了能检测到以腺病毒、鼻病毒为主的常见呼吸道病毒外,新发现呼吸道病毒博卡病毒也有较高的检出率,示其可能是引起鼻炎/鼻窦炎的主要病毒之一;病毒感染后使NWF中嗜酸性粒细胞增高,致鼻呈超敏状态,其机制是否与病毒感染诱发气道炎症介质产生,及其与喘息发作的关系值得进一步研究。