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近年来乳腺癌的发病率呈逐渐增加的趋势,成为危害女性健康的头号杀手。原位乳腺癌并不致命,可以通过手术切除,结合放疗、化疗等手段治愈。然而,一旦乳腺癌发生转移,进入血液、淋巴、骨骼、肺、肝脏等器官,将会直接危及生命。研究发现,许多天然的植物萃取物具有抗癌功效,成为膳食营养和抗癌药物开发的新热点。葡萄皮提取物(GSKE)含有葡多酚、原花青素、白藜芦醇、没食子酸、齐墩果酸等多种活性成分,它具有来源广泛、生物活性高、无毒副作用等优点,可以作为膳食补充剂,在肿瘤的预防和治疗中具有很大的潜力。然而目前关于GSKE抗癌作用的研究主要集中于对肿瘤细胞生长和凋亡的影响,尚未见到GSKE对肿瘤细胞转移影响的报道。本文以天津尖峰天然产物研究开发有限公司提供的GSKE为研究对象,通过体外实验研究其对小鼠乳腺癌4T1细胞迁移的影响;并初步探讨相关分子机制。建立小鼠乳腺癌肺转移模型,研究GSKE在动物体内实验中对小鼠乳腺癌转移的影响。为GSKE作为膳食营养品及新型安全药物的开发利用提供了实验依据,也为通过膳食营养降低乳腺癌转移的风险提供了新的可能。主要研究结果如下:1.细胞迁移实验表明,GSKE对4T1细胞的迁移存在显著的抑制作用,该抑制作用与GSKE的浓度呈现剂量-效应关系。当GSKE浓度为20μg/ml时,完全抑制了4T1的迁移。2.MTT实验表明,GSKE对4T1细胞的增殖活性存在抑制作用,该抑制作用与GSKE的浓度呈现剂量-效应关系。GSKE的半数抑制浓度IC50为72.408μg/ml。细胞凋亡实验表明,GSKE能够诱导4T1细胞的凋亡。当GSKE浓度为20μg/ml时,GSKE对4T1细胞的增殖活性的抑制率为11.37%;4T1细胞的总凋亡率增加11.89%。而此浓度下GSKE完全抑制了4T1的迁移,可见GSKE对4T1细胞迁移的抑制作用不是由于其抑制4T1细胞的增殖活性或者诱导4T1细胞的凋亡而引起的。3.Western blot结果表明,经GSKE处理后,4T1细胞中Akt,PDK1,ERK1/2,p38四种信号分子的总蛋白量保持稳定;而其磷酸蛋白的表达量降低,降低趋势与GSKE浓度呈现剂量-效应关系。这些结果表明,GSKE抑制了PI3K/Akt和MAPK信号通路中相关信号分子的活化,从而阻断了4T1细胞信号转导PI3K/Akt和MAPK通路,由此抑制了4T1细胞的迁移。4.动物实验结果表明,在BALB/c小鼠乳腺癌肺转移模型中,在饮水中补给适当浓度的GSKE可以抑制4T1细胞在动物体内的转移。当GSKE浓度为0.5mg/ml时,荷瘤BALB/c小鼠肺转移率和转移结节数目显著降低,存活时间明显延长。然而,随着饮水中GSKE浓度的增加,其对乳腺癌转移的抑制效果降低。