慢性应激会干扰体内稳态并影响动物的采食、体重,降低动物的生产性能。其中肠道是慢性应激中最易受损的器官之一,IBD、IBS等肠道疾病的发生均与慢性应激有关。这些肠道疾病不仅致死率极高,而且极大的影响了畜禽的经济价值。因此,研究慢性应激致肠道损伤的致病机制在兽医临床中具有重要意义。但到目前为止其具体机制尚不清楚。本试验建立慢性束缚应激模型,通过检测回肠组织病理学及超微结构的变化,并检测TGF-β1信号通路相关蛋白的表达情况,以探讨慢性应激致肠道屏障受损的潜在致病机制。本试验选取40只健康雄性Wistar大鼠,随机均分为空白对照组（C组）8只和慢性应激组（CS组）32只。CS组又分为4个亚组,应激14 d不立即检测组(S₁₄组)、应激14 d立即检测组(S_14L组)、应激21 d不立即检测组(S₂₁组)和应激21 d立即检测组(S_21L组)。S₁₄和S_14L组造模14 d后,S₂₁组和S_21L组造模21 d后(S₁₄组和S₂₁组在造模结束后的第二天进行检测)进行旷场试验,随后采集血液并处死大鼠,取回肠组织备用。通过检测大鼠行为学和血清中相关激素含量,验证慢性应激模型建立成功与否。观察回肠组织病理学变化、回肠超微结构变化、回肠上皮紧密连接结构的变化、炎症相关蛋白表达量、线粒体途径凋亡相关蛋白表达量,以及检测TGF-β1通路SMAD2/3、ERK、JNK和P38的磷酸化水平,从而探究TGF-β1在慢性应激致肠道屏障损伤过程中的作用机制。旷场试验结果表明,与C组相比,S₂₁组大鼠运动轨迹及运动水平显著降低（p<0.01）;激素含量结果表明,与C组相比,S₁₄组和S₂₁组CORT和CRH含量均显著降低（p<0.01）;综合以上结果,在接下来的实验中将应激21 d的大鼠设为CS组。组织病理学结果显示,C组回肠黏膜结构清晰完整,未见炎症水肿及其他病理学改变;CS组回肠黏膜上皮细胞轻度水肿,局部可见炎性细胞浸润,回肠绒毛顶端部分脱落。回肠超微结构观察显示,C组大鼠肠上皮细胞排列紧密,细胞间紧密连接结构清晰;CS组大鼠肠上皮细胞表面微绒毛疏松,线粒体基质肿胀,细胞间紧密连接结构的连续性和完整性被破坏,且免疫组化和实时荧光定量PCR结果显示,CS组大鼠回肠中Claudin3、ZO-1和Occludin的蛋白表达量及m RNA水平明显降低。Western blot结果显示,CS组IL-1β、IL-6、TNF-α、CLIC4、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Cyt C和Bax/Bcl-2表达量显著上升（p<0.01）,免疫荧光结果显示,CS组Cyt C被大量释放到线粒体外,CLIC4被激活。这些结果表明慢性应激致回肠损伤与炎症及线粒体途径的凋亡有关。对TGF-β1通路相关蛋白的检查结果表明,CS组P38磷酸化水平明显升高（p<0.01）,而SMAD2/3、ERK、JNK的磷酸化水平与C组相比无明显变化（p>0.05）,证明炎性因子的激活和线粒体凋亡途径的激活与TGF-β1/P38通路有关。综合分析各部分试验结果证明,慢性束缚21 d可以造成大鼠慢性应激,且慢性应激致回肠损伤时炎症水平及上皮细胞凋亡水平的升高,与TGF-β1/P38通路激活有关。这表明TGF-β1/P38通路可能是临床上防治慢性应激致回肠损伤的关键靶点。