【摘 要】
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本研究以小麦为材料,分别是:中国春(CS)、中国春-2C2C杀配子双体附加系(CS-2C2C)、、农林26(NL26)、农林26-3C3C杀配子双体附加系(NL26-3C3C)。以不同浓度(10μmol/L,50μmol/L,1
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本研究以小麦为材料,分别是:中国春(CS)、中国春-2C2C杀配子双体附加系(CS-2C2C)、、农林26(NL26)、农林26-3C3C杀配子双体附加系(NL26-3C3C)。以不同浓度(10μmol/L,50μmol/L,100μmol/L)的5-氮胞苷(5-AC)进行去甲基化处理,探究DNA甲基化在杀配子作用机制中的作用。从以下3方面入手:(1)细胞学畸变率统计(2)HPLC法检测杀配子染色体的甲基化水平(3)MSAP法检测杀配子染色体的甲基化水平。主要研究结果如下: 1.小麦甲基化调控染色体畸变的研究: 杀配子双体附加系小麦的根尖在经过5-AC处理后出现了染色体断裂、微核、染色体桥、落后染色体等畸变形式。而CS、NL26这两种不含Gc染色体的小麦则不产生以上畸变形式。 2. HPLC法检测小麦甲基化水平 通过HPLC技术检测杀配子双体附加系的基因组DNA甲基化水平均高于普通小麦,所有小麦经过去甲基化处理后,基因组DNA甲基化水平均呈下降趋势。 3. MSAP法检测小麦甲基化水平 通过MSAP技术检测杀配子双体附加系CCGG位点甲基化水平均高于普通小麦,所有小麦经过5-AC处理后,DNA甲基化水平呈下降趋势,CCGG位点上发生了明显的甲基化模式变异。 4. DNA甲基化在杀配子机制中的作用 杀配子机制中的两个功能分别是断裂诱导功能和断裂抑制功能。以上实验结果表明DNA甲基化在杀配子机制中起到断裂抑制功能。去甲基化处理后,断裂抑制功能被抑制,断裂诱导功能处于优势地位,从而导致多种染色体畸变形式的出现。
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