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对实验室保藏的4个红曲菌株分别进行液态和固态发酵筛选,分别测定4个菌株发酵液的抗氧化活性以及其中Dimerumic acid的含量。通过实验发现,液态发酵时紫色红曲菌(M.purpureus)SM005在DPPH自由基清除方面略低,但其对ABTS自由基的清除活性较其它3个菌株明显高出很多,且其发酵液中的Dimerumic acid含量也最高,达到了0.473mg/mL,因此确定紫色红曲菌(M.purpureus)SM005作为液态发酵条件优化的出发菌株;在固态发酵时紫色红曲菌(M.purpureus)SM005无论在ABTS和DPPH自由基清除方面,还是在产Dimerumic acid方面均为最高,且与其他3株红曲菌相差较大。
将筛选得到的红曲菌株M.purpureus SM005进行发酵培养基及发酵条件优化,通过单因素试验以及正交试验确定使该菌株发酵液抗氧化活性及Dimerumic acid含量最高的条件为:麦芽糖4%(40g/L),蛋白胨7%(70g/L),初始pH5.5,接种量8%,培养时间5d。并对正交结果进行方差分析得出所选的发酵条件因素对红曲发酵的影响均为高度显著,且由验证实验得出优化后的发酵条件使得该菌株发酵后Dimerumic acid的含量达到了5.812±0.609mg/mL,比优化前提高了12倍。
紫苏叶水提取物中含有多种具有抗氧化活性的成分,将紫苏叶水提取物与红曲菌共同发酵,实验发现通过超声破碎法提取紫苏叶中的有效成分比热回流法具有一定优点,紫苏叶超声破碎后所得滤液使得红曲发酵液中Dimerumic acid的含量显著提高,达到了3.104±0.086mg/mL,相比于对照提高了46.94%,而热回流法仅为2.737±0.073mg/mL;且用紫苏叶超声破碎后所得滤液替代发酵培养基中的去离子水,使得发酵液的ABTS自由基和DPPH自由基清除活性分别达到了TEAC值7.124±0.061 mmol/L和1.800±0.306mmol/L,相比于对照分别提高了37.86%和157.96%。