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λ-卡拉胶是一种硫酸基取代最多的,来源于海洋红藻的天然植物多糖,是由β(1→3)-D-半乳糖和α(1→4)-D-半乳糖形成的交替共聚物,在二糖单元的D2S,6S-G2S三个位点分别取代了三个硫酸基团,其取代量高达41%。λ-卡拉胶与哺乳动物体内酸性取代基团含量最多的一类多糖~硫酸乙酰肝素(HS)有很强的结构相似性,是外源性的类肝素化合物,其降解产物λ-卡拉胶寡糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗凝血等作用。因此,λ-卡拉胶寡糖在从事糖类的生理和药理的应用方面具有极大的开发空间。但是λ-卡拉胶寡糖由于高硫酸基取代的不稳定性及缺乏酰胺基等基团,其分离和检测难度非常大,目前尚无相关报道。本研究首先以λ-卡拉胶为原料,采用卡拉胶降解菌(Pseudoalteromonas carrageenovora)对其进行降解,研究了不同条件下λ-卡拉胶的降解特征,获得了λ-卡拉胶寡糖混合物,并通过活性炭吸附和乙醇解吸附得到聚合度(dp)较小的寡糖混合物,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术分析比较不同条件下λ-卡拉胶的降解和寡糖的含量变化,得到最适的λ-卡拉胶降解方法,建立了离子对-反相高效液相色谱-三重四级杆质谱(RPIP-HPLC-ESI-MS)联用系统快速分离鉴定λ-卡拉胶寡糖的方法。利用制备型HPLC制备获得了6种纯的λ-卡拉胶寡糖。最后,利用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)为实验研究对象,将制备得到的几种λ-卡拉胶寡糖配成不同的浓度处理细胞,分别测定不同聚合度的λ-卡拉胶寡糖与两种蛋白质受体(碱性成纤维细胞生长因子bFGF和乙酰肝素酶)的互作情况。本文提出了利用卡拉胶降解菌对λ-卡拉胶进行特异性降解,通过优化降解条件,大大提高了λ-卡拉胶寡糖的分离度及检测灵敏性,当选用5mM庚胺乙酸盐水溶液(pH至5.5)(A)和5mM庚胺乙酸盐甲醇溶液(pH5.5)(B)作为梯度洗脱溶剂,λ-卡拉胶寡糖通过Hypersil GOLD C18反相色谱柱分离,在正离子模式下分离得到dp2-15的14种λ-卡拉胶寡糖,并进一步确定所得到寡糖的结构及序列信息,建立了λ-卡拉胶寡糖的结构分析方法,为硫酸寡糖的快速鉴定和结构解析提供了参考价值。制备得到的6种不同聚合度的λ-卡拉胶寡糖的生物活性实验表明,λ-卡拉胶寡糖的活性与其分子量大小具有重要的关系,较大聚合度的λ-7在和bFGF细胞因子的结合与抑制乙酰肝素酶活性方面均表现出较高的生物活性,为今后研究λ-卡拉胶寡糖的抗血管新生等方面具有重要的意义。