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长春花（Catharanthus roseus G.Don）为夹竹桃科（Apocynaceae）,长春花属（Catharanthus G.Don）多年生草本植物,其茎直立,多分枝,高40～60cm;叶柄短,全缘;花玫瑰红,黄或白色等,一年四季都可开花。长春花株形整齐,叶片苍翠,花色鲜艳,开花期长,观花、观叶两用,适用于盆栽、花坛和岩石园观赏,是我国常见园林花卉之一。我国传统的长春花栽培品种花朵较小,开花不多,株形较高,不适宜盆栽或花坛栽培。近年来在我国流行的株型矮小、开花繁多品种多为国外选育成的F1品种,我国不能制种,需要年年买种,或采用扦插或分株繁殖,但繁殖系数低、季节性强。本研究以长春花‘地平线’品种为试材,目的在于通过离体无菌培养的方法,建立长春花优良品种的无性繁殖技术体系,探索为规模化长春花生产提供优质种苗的新方法;并系统研究秋水仙素离体诱导长春花多倍体的条件,培养长春花的多倍体新种质,为选育具有自主知识产权的、观赏价值更高、抗逆性增强的新优品种打下基础。研究结果表明,长春花外植体经75%的乙醇消毒30s、0.1%的升汞处理7min后,用无菌水冲洗4～5次,能取得60%的初代成活率;初代诱导芽分化的最佳培养基为MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.05mg/L,出芽率达100%,平均成芽数为3.9个;最佳继代增殖的培养基为MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.05mg/L,增殖系数可达到4.03倍;生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L,植株和根系生长状况良好,生根率为100%,移栽成活率90%以上。采用秋水仙素浸泡法和混培法对长春花茎尖进行多倍体诱导,其中浸泡法处理效果较好,以0.1%秋水仙素溶液浸泡处理茎尖24h,诱导率可达到10%;秋水仙素诱导获得了纯合四倍体（2n=4x=32）,也得到部分四倍体与二倍体细胞混合存在的嵌合体变异类型。长春花四倍体变异材料在二倍体的最适继代培养基和生根培养基上增殖、生根情况良好,移栽成活率为75%。长春花四倍体植株平均叶厚0.36mm,比二倍体显著要厚,但叶更短、更宽,叶形指数为1.34;保卫细胞增大,长度为二倍体的134.0%,宽度为二倍体的156.7%;叶绿体数目增多,为二倍体的153.3%。四倍体和二倍体长春花植株在人工逆境胁迫下,生理反应有一定差异。经同样的-10℃处理后,四倍体比二倍体的电解质外渗率低,前者为33.23%,后者达51.56%,说明耐寒能力相对较强;在聚乙二醇脱水处理的条件下,二倍体细胞的膜损伤率为43.53%,四倍体的细胞膜损伤率为28.21%,明显低于二倍体,四倍体表现出较强的抗脱水能力。经移栽成活后的长春花四倍体植株较其二倍体植株节间短、株形矮壮、叶色浓绿、叶片增厚,观赏性上有一定变化。由于时间关系,四倍体植株目前尚未开花,其开花习性与观花效果还有待观察。