濒危附生兰华石斛种子生物学研究

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石斛属(Dendrobium)为兰科(Orchidaceae)植物的第二大属,具有重要的园艺价值和药用价值,但因气候变化、生境破碎以及人为过度采挖,野生石斛属植物资源急剧锐减。华石斛(D.sinense)为濒危附生兰,海南特有种,由于其对生存环境的苛刻要求以及植物本身复杂的繁育系统,造成野生种极度匮乏。而种子作为华石斛最基本的繁殖材料,数量庞大,其相关生物学研究对华石斛种质资源保育具有重要意义。本文通过对华石斛种子形态观察、活力测定、种子保存和非共生萌发四个部分来探讨其种子生物学特性,相关研究结果如下:(1)种子形态学利用显微技术观察种子形态,得出华石斛种子长0.273±0.016mm,宽0.096±0.006mm,体积为 0.65±0.005mm3,胚长 0.167±0.013mm,胚宽 0.077±0.005mm,胚体积为0.53±0.005mm3,胚与种子体积比为0.81±0.03,蒴果内含种子12-24万粒/果,在石斛属植物中华石斛种子属于中等大小种子。(2)种子活力测定采用TTC法和紫外分光光度计法测定华石斛种子活力。使用5%Ca(ClO)2浸泡种子120min或者2.5%NaClO浸泡60~90min,再经1%TTC黑暗染色24h,染色效果较好,且次氯酸钙处理效果更好。紫外分光光度计法测定浸泡4h的紫外吸光值最能体现种子活力。(3)种子保存采用变色硅胶、无水氯化锂和米粉对华石斛种子进行保存,硅胶和无水氯化锂适合华石斛种子保存。低含水量适宜保存华石斛种子,4%含水量贮藏温度范围较广,且在-20℃贮藏活力保持最好。低温适宜贮藏华石斛种子,且贮藏最适温度受种子含水量的影响。35.4%高含水量种子不宜保存在-20℃环境中,8.9%、18.9%适宜保存在4℃,而4%含水量种子保存的最佳温度为-20℃。华石斛种子属于正常型种子。(4)种子非共生萌发试验从MS培养基浓度、激素种类及浓度以及植物添加物种类对华石斛种子非共生萌发进行探讨。1/2MS对华石斛种子萌发及原球茎增长、幼苗出叶的促进效果最佳;不同激素及不同浓度对华石斛种子萌发及原球茎增长效果差异显著,0.5mg/LNAA效果最好;不同植物添加物对华石斛种子萌发及原球茎增长效果不同,10%土豆泥、椰子汁和香蕉泥促进种子萌发,而只有10%香蕉泥促进原球茎、叶片和根的生长。
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