紫花苜蓿与丛枝菌根真菌共生条件下差异蛋白质组学研究

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紫花苜蓿(Medicago sativa)是重要的多年生饲用牧草因其营养丰富,适口性好,产草量高,抗逆性强。在我国黑龙江南部、河北、安徽北部、云南以及黄土高原区广泛种植,是我国畜牧业的生产和发展中至关重要的成员。紫花苜蓿与丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhiza fungi,AM真菌)具有良好的共生性,菌根共生能够显著促进紫花苜蓿的生长发育、养分吸收、产品质量以及抗胁迫性等方面能力。因此本论文采用TMT定量蛋白组测序方法,挖掘侵染丛枝菌根真菌的紫花苜蓿与未侵染丛枝菌根真菌的样本之间的差异蛋白质,着重分析早期差异蛋白及代谢通路,进而丰富植物-微生物共生的分子机制。研究结果如下:通过反复多次分析,获得了稳定的共生体系,为AM真菌与紫花苜蓿共生机制研究提供了可靠保证。通过台盼蓝染色观察显示,7 d左右AM真菌开始侵染紫花苜蓿,14 d时已完成共生。随着共生时间的延长,AM真菌侵染率逐渐提高。AM真菌侵染的紫花苜蓿根长、株高以及生物量显著高于未接种组。蛋白质组学分析显示,丛枝菌根真菌侵染紫花苜蓿过程中的蛋白表达呈现差异,侵染AM真菌7 d时,紫花苜蓿根中蛋白有68个表达上调,141个表达下调;14天时,紫花苜蓿根中蛋白有55个表达上调,69个表达下调;28 d时,紫花苜蓿根中蛋白有99个表达上调,102个表达下调。这些差异蛋白主要与参与细胞骨架组成、木质素合成通路、脂质转运结构域等功能。另外关注了富集到的5个Lectin蛋白,发现其变化在共生不同时期显著差异且主要成员呈动态变化,其可能在植物-AM真菌共生早期发挥功能。本研究建立了稳定的紫花苜蓿-AM真菌共生体系,对共生早期差异蛋白及代谢通路进行了初步解析,研究结果可以丰富植物-微生物共生分子机制,对提高紫花首蓿生长发育、养分吸收、产量品质等具有一定的参考价值。
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