论文部分内容阅读
本文以油茶粕蛋白为原料,研究了酶解所得油茶粕多肽的抗氧化活性、抑菌活性及安全性,主要试验结果如下：本研究以抗亚油酸过氧化能力为指标,对Alcalase、 Papain、 Trypsin、 Flavorzyme、 Neutrase等5种蛋白酶进行了筛选,并运用软件Design-Expert7.1Trial,确定了酶解油茶粕蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺参数。结果表明：采用Alcalase酶解油茶粕蛋白明显优于其它4种蛋白酶,其酶解最佳条件为pH值8.3,底物浓度16.8mg/g,反应温度48.8℃,反应时间6.5h。此时所得油茶粕多肽对亚油酸过氧化抑制率为60.83%±0.57%(n=3),与预测值61.86%非常相近,说明采用响应面法优化得到的酶解参数是可靠的,具有可行性。通过测定所得油茶粕多肽的还原能力、清除羟自由基(OH.)能力、对Fe2+螫合能力及清除DPPH自由基能力,进一步研究了油茶粕多肽的体外抗氧化作用。结果表明：油茶粕多肽具有较强清除羟自由基(OH-)、DPPH自由基的能力,其IC50值分别为0.181g/L和0.367g/L,分别是维生素C的IC50值的1.56倍和52.4倍。油茶粕多肽螯合Fe2+的ICso值约为EDTA的3890倍。通过动物实验分析了油茶粕多肽对小鼠抗氧化功能的调节作用。灌胃四氯化碳使小鼠肝中毒,1h后分别灌胃不同量的油茶粕多肽溶液,24h后测定小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,结果表明油茶粕多肽能显著降低小鼠肝脏中MDA的含量,恢复SOD及GSH-PX的活力,表现出很强的体内抗氧化活性。以油茶粕蛋白为原料,采用Pepsin蛋白酶水解,并对酶解工艺进行优化。以大肠杆菌的抑菌率为指标,采用响应曲面分析法,设计了4因素5水平实验,确定了酶解油茶粕蛋白获取油茶粕抗菌肽的最佳工艺条件,酶添加量为0.22%,pH值为2.36,反应温度36.82℃,反应时间为5.99h。在此条件下,获取的油茶粕多肽对大肠杆菌的抑制率达到67.08%±0.22%(n=3),与预测值67.32%非常相近。按照食品安全性毒理学评价程序和方法对油茶粕多肽进行急性毒理学试验、遗传毒性试验和30天喂养试验。采用一次最大限量法(摄入量为20.00g/kg·kw),进行油茶粕多肽对大、小鼠急性毒性试验,无死亡；小鼠精子畸变试验、Ames试验和骨髓嗜多染红细胞微核试验结果均为阴性；30天喂养试验中各项指标均未见异常。研究结果初步表明油茶粕多肽为属实际无毒物。