原肌球蛋白对肌球蛋白的作用研究

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目的原肌球蛋白是一种细肌丝相关蛋白,对肌肉收缩起重要调节作用。有报道原肌球蛋白可以影响肌球蛋白Mg2+-ATPase活性,但其与肌球蛋白间的相互作用还不完全清楚。在本研究中,我们提出原肌球蛋白与肌球蛋白可能存在某种相互作用以及这种相互作用与肌球蛋白Mg2+-ATPase活性之间可能存在关联的假设。为了验证这个假设,我们在肌动蛋白存在和不存在两种条件下分别考察了心肌和平滑肌中原肌球蛋白与未磷酸化和磷酸化肌球蛋白的相互作用以及原肌球蛋白对两种状态肌球蛋白Mg2+-ATPase活性的影响。方法(1)结合实验:我们用结合实验考察原肌球蛋白与肌球蛋白的相互作用;(2)测定原肌球蛋白对不同状态肌球蛋白Mg2+-ATPase活性的影响。结果(1)肌动蛋白不存在条件下的相关实验:1)在结合实验中,原肌球蛋白可以分别减少心肌和平滑肌中肌球蛋白的沉淀量,这提示原肌球蛋白可以促进肌球蛋白的溶解,即具有促溶作用;2)在Mg2+-ATPase活性测定实验中,原肌球蛋白可以分别增加心肌和平滑肌中肌球蛋白Mg2+-ATPase活性。(2)肌动蛋白存在条件下的相关实验:1)在结合实验中,原肌球蛋白可以显著抑制心肌和平滑肌中肌球蛋白与肌动蛋白之间的结合;2)在Mg2+-ATPase活性测定实验中,原肌球蛋白可以抑制心肌中肌动蛋白激活的肌球蛋白Mg2+-ATPase活性,然而原肌球蛋白增加平滑肌中肌动蛋白激活的肌球蛋白Mg2+-ATPase活性。结论(1)本研究提示原肌球蛋白对肌球蛋白具有促溶作用,这种作用与其它调节蛋白如actin、calponin和caldesmon对肌球蛋白的作用不同,后三者为与肌球蛋白结合使之沉淀。此外,原肌球蛋白对肌球蛋白的促溶作用具有如下两方面特征:第一,原肌球蛋白不仅对未磷酸化而且对磷酸化的肌球蛋白也具有促溶作用;第二,原肌球蛋白的这种促溶作用在心肌和平滑肌中具有一致性。(2)在肌动蛋白不存在条件下,原肌球蛋白增加肌球蛋白Mg2+-ATPase活性的作用在心肌和平滑肌中也具有一致性;(3)原肌球蛋白抑制心肌和平滑肌中肌球蛋白与肌动蛋白结合的作用在心肌和平滑肌中也具有一致性;(4)原肌球蛋白对心肌和平滑肌中肌动蛋白激活的肌球蛋白Mg2+-ATPase活性的作用相反。本研究为更准确地阐明肌肉收缩机制提供了一些有用的信息。
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