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木质素是影响苎麻纤维品质的主要成份,常规育种或栽培措施来控制木质素含量总难达到理想的效果。通过基因工程技术降低木质素的含量或改变其组分,进行低木质素育种,是苎麻遗传改良非常有前景的领域。 本研究分别构建了苎麻咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(CCoAOMT)基因正义和反义表达载体,通过农杆菌介导转化木质素研究的模式植物烟草WS38,以了解苎麻CCoAOMT基因对木质素合成的作用和降低木质素含量的可行性。本文的主要研究结果如下: (1)以pBI121为载体,构建了苎麻CCoAOMT基因35S启动子控制的反义cDNA基因质粒(pBI121-antiBNCCoAOMT),转化模式植物烟草W38,获得了转基因植株。 (2)以pWM101为载体,构建了苎麻CCoAOMT基因35S启动子控制的其cDNA全长表达质粒(pWM101-BnCCoAOMT),并对模式烟草进行了遗传转化。 (3)对转基因植株进行了分子分析和初步的组织学研究。苎麻基因在烟草中组成型表达,对烟草生长产生了一定影响,无论正义基因还是反义表达基因,转基因植株比对照植株生长较缓慢。组织学研究表明,反义转基因烟草细胞壁木质素含量降低,而正义转基因细胞壁变化不明显。 上述研究结果为深入研究苎麻CCoAOMT基因及其在木质素代谢中的功能提供了一定的参考。为低木质素或木质素组分改良的苎麻基因工程积累了经验。