【摘 要】
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神经损伤是临床工作中常见的疾病,目前尚未有理想的治疗措施以有效促进其形念和功能的修复,主要原因为分化成熟的神经细胞无法分裂,损伤后不能增殖替代丧失的细胞。干细胞的
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神经损伤是临床工作中常见的疾病,目前尚未有理想的治疗措施以有效促进其形念和功能的修复,主要原因为分化成熟的神经细胞无法分裂,损伤后不能增殖替代丧失的细胞。干细胞的发现为神经损伤的治疗带来了新的思路。 人们在研究中发现,无论是胚胎来源还是成体来源的干细胞在一定条件下,都能分化为神经干细胞、神经元及胶质细胞等,这为干细胞移植治疗神经损伤提供了实验依据。骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)是一类特殊类型的干细胞,广泛存在于骨髓组织中,来源丰富、取材方便,因而被认为是最有临床应用前景的干细胞来源之一。 本课题以大鼠BMSCs为研究对象,结合基因治疗的相关思路和技术,构建了带有脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)受体—蛋白酪氨酸激酶受体B(protein-tyrosine kinase receptor B,trkB)基因的真核表达载体,并将其转入BMSCs,以期有效改善体外培养及移植后BMSCs的长期存活能力、提高细胞应用的生物安全性,为BMSCs最终用于治疗神经损伤性疾病提供实验依据。 第一部分:蛋白酪氨酸激酶受体trkB基因扩增和真核表达载体的构建 目的:扩增trkB基因并构建带有该基因的真核表达载体。 方法:针对大鼠trkB基因全长,结合pEGFP-C2载体的多克隆位点区中各
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