【摘 要】
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目的：黄曲霉毒素B1（AFB1）是一种具有强致癌性、致畸性和遗传毒性的物质，本研究所已经分离出一种产黄曲霉素解毒酶（ADTZ）的真菌E20，并对其进行基因克隆和重组表达，得到了重组黄曲霉毒素解毒酶（rADTZ）。前期的研究工作推断ADTZ催化AFB1是先氧化后水解生成无毒产物，氧化是一个重要的启动过程。本研究通过电化学方法探讨ADTZ催化AFB1的途径和酶的性质。方法：采用疏水层析（HIC）纯化A
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目的：黄曲霉毒素B1（AFB1）是一种具有强致癌性、致畸性和遗传毒性的物质，本研究所已经分离出一种产黄曲霉素解毒酶（ADTZ）的真菌E20，并对其进行基因克隆和重组表达，得到了重组黄曲霉毒素解毒酶（rADTZ）。前期的研究工作推断ADTZ催化AFB1是先氧化后水解生成无毒产物，氧化是一个重要的启动过程。本研究通过电化学方法探讨ADTZ催化AFB1的途径和酶的性质。方法：采用疏水层析（HIC）纯化ADTZ、DEAE纯化rADTZ，制备较高纯度和比活力的ADTZ及rADTZ。活化MWNT、SWNT使之带上-COOH，以共价交联的方式制备ADTZ/MWNT修饰电极及rADTZ/SWNT修饰电极，利用电化学分析技术-循环伏安法（CV）、微分脉冲伏安法（DPV），对黄曲霉毒素（AFB1）、杂色曲霉素（ST）、杂色曲霉素（VA）、二氢吡喃（DHP）、四氢呋喃（THF）、苯并呋喃（BF）及8-甲氧基补骨脂素（8-MOP）进行检测并分析其电信号。利用辣根过氧化物酶分析电极检测ADTZ催化体系中是否产生了H2O2，并通过往分析体系中通O2或通N2的电化学变化，探讨O2对ADTZ催化体系的影响。结果与结论：（1）rADTZ-SWNT修饰电极对AFB1、ST、VA、DHP、THF、8-MOP及BF进行检测，对AFB1、ST、VA、DHP、THF检测到了信号，对8-MOP及BF未能检测到信号，可能由于呋喃环紧挨苯环导致不易失电子，反应难以进行；（2）用纳米管固定辣根过氧化物酶，检测到了rADTZ催化AFB1、DHP、THF的过程中产生了过氧化氢；（3）氧气能加强rADTZ催化AFB1的氧化还原电信号；（4）实验结果表明rADTZ催化反应存在氧化还原过程，反应中产生了H2O2，氧对催化反应有加强作用，提示ADTZ为一种单加氧酶。
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