旋覆花抗植物病原真菌活性研究

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从植物中寻找抗菌活性物质,开发植物源杀菌剂是当前新农药创制的一条重要途径。目前,国内外对菊科旋覆花属植物旋覆花(Inula Britannica L.)抗植物病原真菌活性的相关研究报道较少。本论文采用活性跟踪与化学分离相结合的手段对旋覆花不同部位、不同极性溶剂的抗植物病原真菌活性进行系统测试,为寻找新的具有抗菌活性的植物资源及活性先导化合物提供科学依据。主要研究结果及结论如下:采用生长速率法和孢子释放法分别测试了旋覆花根、茎、叶和花不同部位的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇4种溶剂提取物对辣椒疫霉病菌和小麦全蚀病菌的抑菌活性。结果表明:旋覆花不同部位的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取物对辣椒疫霉病菌和小麦全蚀病菌均具有一定程度的抑制作用。叶和花的四种溶剂提取物对两种病原菌菌丝生长的抑制率高于根和茎提取物的抑制率。叶的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的提取物对辣椒疫霉病菌菌丝生长抑制率分别为81.17%、88.29%、95.43%和87.16%,对小麦全蚀病菌菌丝生长抑制率均达100%;花的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的提取物对辣椒疫霉病菌菌丝生长抑制率分别为81.19%、93.15%、100%和95.43%,对小麦全蚀病菌菌丝生长抑制率均为100%。采用渗漉法以95%乙醇对10 kg旋覆花花序干样进行提取,并以石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇4种不同极性的溶剂采用液-液分配法对旋覆花乙醇提取浸膏分别进行萃取分离。结果表明,旋覆花乙醇提取浸膏萃取率为75.23%。为旋覆花抗菌活性物质的进一步分离,采用离体法和活体组织法,系统测试了乙醇浸膏石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇4种不同极性溶剂萃取物对14种植物病原真菌的抗菌活性。结果表明。在1.0 mg·mL?1处理剂量下,氯仿萃取物对各供试菌菌丝生长均有较强的抑制作用,其中对小麦全蚀病菌、辣椒疫霉病菌和油菜菌核病菌菌丝生长抑制率分别为91.67%、73.77%和66.25%,进一步测定了其对小麦全蚀病菌的毒力回归曲线为Y=4.1819X+1.8639(r=0.9508),抑制中浓度EC50为2.747 mg·mL?1;在1.0 mg·mL?1处理剂量下,氯仿萃取物对各供试菌孢子萌发也有不同程度的抑制作用,除苹果斑点落叶病菌和玉米大斑病菌外,氯仿萃取物可显著抑制麦冬炭疽病菌、棉花枯萎病菌、板栗炭疽病菌、玉米青枯病菌和辣椒枯萎病菌的孢子萌发,抑制率分别达96.00%、92.44%、80.43%、78.45%和71.84%。果实针刺法测定结果表明,在2.0 mg·mL?1处理剂量下,氯仿萃取物对番茄灰霉病的治疗效果和保护效果分别为57.65%和50.60%(6 d),其中治疗效果与对照药剂0.4 mg·mL?1施佳乐无显著差异。为进一步明确旋覆花氯仿萃取物的抗菌作用谱,采用生长速率法、孢子萌发法测定了旋覆花花序氯仿萃取物对另外9种植物病原真菌的离体抑菌活性,并测定了其对黄瓜灰霉病的防治效果。结果表明,在1.0 mg·mL?1的处理剂量下,氯仿萃取物对西瓜炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌菌丝生长具有较强的抑制作用,抑制率均在50%以上;对烟草赤星病菌、西瓜炭疽病菌和番茄果腐病菌孢子萌发抑制率高达63.33、92.90%和82.92%。在10.0 mg·mL?1处理剂量下,氯仿萃取物对黄瓜灰霉病的治疗效果和保护效果分别为54.27%和76.68%(48 h),其中保护效果与对照药剂0.4 mg·mL?1施佳乐无显著差异。
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