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本论文通过研究海参肠壁中的多糖水解酶的活性,旨在为海参肠壁的综合利用提供理论指导。首先,本论文以α-淀粉、羧甲基纤维素钠、壳聚糖、木聚糖、海带多糖作为底物,探究海参肠壁浸提液中多糖水解酶的存在,结果表明：浸提液中含有能够作用于a-1,4糖苷键以及p-1,3糖苷键的多糖水解酶,其中以α-淀粉酶的活力为最高。其次,以淀粉酶活力为技术指标优化了海参肠壁中淀粉酶的浸提过程,并对浸提液中淀粉酶的理化性质进行了探究。结果表明,淀粉酶的最适浸提pH为7.0,浸提离子强度为0.05M,浸提时间为4h；浸提液中粗酶的最适酶解pH为6.0,接近海参肠壁的生理pH 6.2,最适酶解温度分别为20℃和60℃。热稳定性实验表明,经高温处理后,在20℃条件下所测酶活力降低明显；而在60℃条件下所测酶活力降低稍低于前者,因此推测能够降解淀粉的多糖水解酶可能是两种酶。再次,对盐析的饱和度进行了探讨,并对经盐析、透析后的粗酶进行了理化性质研究。研究表明,当饱和度小于50%的时候,浸提液析出的蛋白量很少；当饱和度在50%-60%之间时,蛋白质析出的速率最快；在90%饱和度时,析出的蛋白量和多糖水解酶的活力(60℃条件下酶解)均达到最高值；然而,在20℃酶解时,各个饱和度所得到的粗酶的活力均明显低于60℃,可能的原因为：①20℃活力比较高的酶分子量比较小,经透析而被除去；②该酶为一种金属激活酶,在盐析、透析过程中造成了金属离子的丧失,进而使酶失活。此外,酶学性质研究结果表明,透析液的最适酶解pH为6.0,最适酶解温度为60℃,热稳定性在低于60℃时保持稳定,最适稳定pH为7.0。最后,将透析酶液进行QFF强阴离子交换层析以及Sephacryl S-300凝胶层析,所得淀粉酶的纯化倍数是浸提液的15.04倍,在通过SDS-PAGE电泳时发现该淀粉酶具有两个亚基,其分子量分别为35.5kDa、33.2kDa。此外,对经过纯化的酶液进行部分理化性质的研究,结果表明,该酶的最适酶解pH为6.0,最适酶解温度为60℃,并且在60℃以后热稳定性开始变差。Ca2+, Fe3+,Zn2+, Cu2+, Mn2+对淀粉酶具有抑制作用,随着金属离子浓度的增加,其抑制效果也在增强,其中抑制效果最为显著的是Fe3+；K+对淀粉酶具有明显的激活作用,随着金属离子浓度的增加,其激活效果也在增强；EDTA的加入使得酶降低了约为30%左右的酶活力,因此判断淀粉酶是一种金属酶。