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灰树花,是一种珍贵的食、药同源真菌。有研究报道灰树花在防治糖尿病、高血脂等方面具有良好的效果。脂质代谢紊乱引发的高血脂、高血糖、脂肪肝等代谢综合征已成为全球性健康问题之一。因此,本课题以灰树花为材料,利用多种不同极性的溶剂提取,并通过体外模型筛选出其中具有改善脂质代谢的活性组分,最后通过动物模型实验验证该活性组分对脂质代谢紊乱的改善作用。主要研究内容和结果如下:(1)用己烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇和去离子水进行顺序溶剂提取分别得到HE、CE、EAE、ME、WE提取物;用不同浓度的乙醇-水溶液进行提取分别得到100%EE、80%EE、60%EE、40%EE、20%EE、0%EE提取物。通过体外模拟胆汁胶束法、脂肪酶抑制等方法比较这11种提取物的活性,发现灰树花EAE提取物对脱氧胆酸钠和胆酸钠的结合量最高,分别达到24.59和22.19μ mol/100mg;抑制脂肪酶的活性最高,为73.15%;DPPH清除力仅位于第二,总还原力活性居中。综合考虑,最终确定了灰树花中较强活性组分为EAE提取物。(2)利用单因素以及响应面法获得灰树花EAE提取物的最佳工艺条件:料液比为29:1(mL/g),超声时间为30min,提取温度为50℃,并在此条件下进行提取使得率达到0.566%。进一步通过UPLC-MS/MS对灰树花EAE组分进行鉴定,发现其主要成分包括:野靛黄素和矢车菊素-3-O-芸香糖苷。(3)本文建立了高脂饮食诱导的Wistar大鼠脂质代谢紊乱模型,并用此模型评价了灰树花EAE提取物(高剂量HEAE 50 mg/kg、中剂量MEAE25mg/kg、低剂量LEAE 12.5mg/kg)对大鼠脂质代谢紊乱的改善作用。结果发现:与模型组相比,灰树花高剂量EAE提取物可以显著降低体重、肝重以及体内脂肪含重(P<0.01);能够明显地降低血糖含量(P<0.01),增加血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)含量(P<0.05);可以显著降低肝脏总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量(P<0.01);能够明显地促进肠道中TC和TG的排出,抑制脂肪酶的活性(P<0.01或P<0.05)。说明灰树花高剂量EAE提取物可以有效地抑制高脂饮食大鼠脂肪的消化与吸收。(4)基于16S rRNA基因V3-V4可变区的肠道菌群高通量测序技术,研究灰树花高剂量EAE提取物对高脂饮食大鼠肠道菌群结构的影响,并且通过多元统计分析方法对肠道菌群与血液生化、肝脏生化及粪便生化指标进行相关性分析。结果发现灰树花EAE提取物能够上调 OTU102(Enterococcus sp.)、OTU142(Enterococcus sp.)、OTU252(Enterococcus sp.)、OTU333(Bacteroides chinchillae)、OTU352(Enterococcus sp.)、OTU561(Enterococcus sp.)、OTU613(Enterococcus sp.)、OTU627(Sporobacter termitidis)、OTU641(Ruminococcus bromii)和 OTU93(Clostridium saccharolyticum)这10种菌。通过肠道菌群结构与血液生化、肝脏生化及粪脂生化的相关性分析进一步证实了灰树花EAE的确可以通过上调Enterococcus、Bacteroides、Sporobacter、Ruminococcus 和 Clostridium 属有益菌从而起到改善脂质代谢的作用。