婴幼儿在生长发育过程中,对维生素、蛋白质、微量元素等营养元素的需求量较高,左旋肉碱和胆碱都是婴幼儿生长发育所必须的水溶性营养元素,新生儿由于自身合成能力不足,所以必须依靠外源摄入来补充。母乳可以为婴幼儿提供生长所需的左旋肉碱和胆碱,但在母乳不足的时候,则需要通过婴幼儿配方食品,尤其是乳粉来进行补充。因此,婴幼儿配方食品中必须添加这两种营养成分。目前国标中分别采用酶显色法和雷氏盐比色法检测这两种物质,缺点是无法实现精准定性确证,在定量检测过程中检出限较高,且样品制备过程复杂、操作时间较长,不适合快速批量检验。基于以上背景本文建立了同位素内标-液相色谱-串联质谱法同时检测这两种水溶性营养元素的分析方法,实验结果如下:样品经温水溶解混匀后加入同位素内标,经盐酸、超声提取后,用甲酸水-乙腈稀释并沉淀蛋白,经过0.2μm滤膜后,采用Agilent HILIC色谱柱(3.5μm,100 mm×2.1 mm)进行分离,柱温为35℃,流速为0.3 mL/min,进样量为2μL,梯度洗脱条件进行分离,采用多反应监测模式(MRM)进行定性、定量分析,同位素内标进行校正。实验结果表明,左旋肉碱及其内标物在0.005~0.100 mg/L范围内、胆碱及其内标物在0.025~0.500 mg/L范围内线性关系良好(标准品);左旋肉碱的回收率在87.7%~101.0%之间,胆碱回收率在80.6%~105.0%之间;相对标准偏差(RSD)左旋肉碱<3.48%、胆碱<8.58%;检出限(LOD)左旋肉碱为1.5 mg/kg、胆碱为6.0 mg/kg;定量限(LOQ)左旋肉碱为4.5 mg/kg、胆碱为18.0 mg/kg(样品)。采用建立的液相色谱-串联质谱法分别对乳基和豆基婴幼儿配方粉样品进行含量检测、极限运输条件实验和模拟冲泡实验。被测不同品牌婴幼儿配方粉样品中左旋肉碱和胆碱的实际检测值都达到了标签上含量的80%左右;通过极限运输条件实验得出:婴幼儿配方食品在运输周期较长的情况下,最佳储存温度为25℃;在运输周期较短的情况下,最佳储存温度为0℃~37℃;通过模拟冲泡条件实验得出:婴幼儿配方粉的最佳冲泡温度为40℃,并且冲泡后应立即饮用,若冲泡后不能立即饮用,需在冷藏条件下储存,且存放时间不宜超过72h。