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目的:缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是由脑血流供应受阻导致的脑组织损害。该病目前治疗效果欠佳,多数患者留有严重后遗症,儿童更甚,因此寻找新的、有效的治疗是亟需解决的问题。近年研究发现,p53基因与HIBD有关,抑制或选择性敲除p53具有一定的保护作用,但p53基因敲除小鼠在HIBD处理后对神经细胞的保护作用尚不清楚。本研究旨在揭示幼年p53基因敲除小鼠在HIBD后神经元死亡及凋亡的情况,以期为幼儿HIBD的治疗提供理论依据。方法:选取幼年(3-6周龄)p53基因敲除及野生型小鼠,首先观察两种基因型小鼠体重和大脑轮廓,并利用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosi,HE)染色观察神经系统各区域神经元形态。此外,通过制备离体脑片(300?m),用氧-糖剥夺液(oxygen-glucose deprivation,OGD)模拟体外缺氧缺血模型,以TOPRO-3标记死亡神经元,观察体外缺氧缺血损伤后两种基因型小鼠脑片中大脑皮层及海马等部位神经元死亡的情况。最后利用动脉夹夹闭双侧颈总动脉(Bilateral common carotid artery,BCCAO)构建在体全脑缺氧缺血再灌注损伤模型,双侧颈总动脉夹闭30 min后松开动脉夹,使血流再灌注12 h或24 h,并用尼氏染色和FLUORO-JADE?C(FJC)染料分别对神经系统神经元死亡及凋亡情况进行评估。结果:1、p53基因敲除小鼠与野生型同龄小鼠相比,其体重、大脑解剖形态、海马及大脑皮层各区域神经元的排列无明显不同。2、TOPRO-3染色结果显示,p53基因缺失小鼠脑片经OGD处理后,海马CA1区、齿状回(DG)区和大脑皮层死亡的神经元数量较野生型少。3、尼氏染色结果显示,在体缺氧缺血(BCCAO模型)情况下,颈总动脉再灌注12 h后,野生型小鼠BCCAO组海马DG区和大脑皮层存活神经元数目较对照组明显减少;再灌注24 h的野生型小鼠中,BCCAO组仅大脑皮层较对照组存活神经元数目减少,而p53基因敲除后两组均无明显变化。4、FJC染色结果显示,在体缺氧缺血(BCCAO模型)情况下,野生型小鼠BCCAO组CA1区凋亡神经元数目与对照组比较,无明显改变,p53基因敲除小鼠两组间(BCCAO组和对照组)神经元凋亡数目亦无明显变化;野生型小鼠BCCAO组DG区及大脑皮层神经元凋亡数目较对照组明显增加,而p53基因敲除两组小鼠DG区及大脑皮层凋亡神经元无明显变化。结论:体外及体内实验均证实,p53基因敲除对幼年小鼠HIBD后的神经系统具有保护作用。