【摘 要】
：
目的:恶性肿瘤是人体内正常的细胞发生了基因突变现象,从而引发了恶性增殖,在发生早期并没有十分明显的症状,不易被察觉发现,等患者出现特异性症状时,已经发展为晚期,因此患者死亡率极高。近些年随着对免疫联合治疗的了解和研讨,肿瘤的免疫治疗方法为肿瘤患者的救治提供了新的思路,其中细胞过继免疫治疗更是有效治疗癌症的途径之一,由细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK,cytokine-induced killer）是
论文部分内容阅读
目的:恶性肿瘤是人体内正常的细胞发生了基因突变现象,从而引发了恶性增殖,在发生早期并没有十分明显的症状,不易被察觉发现,等患者出现特异性症状时,已经发展为晚期,因此患者死亡率极高。近些年随着对免疫联合治疗的了解和研讨,肿瘤的免疫治疗方法为肿瘤患者的救治提供了新的思路,其中细胞过继免疫治疗更是有效治疗癌症的途径之一,由细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK,cytokine-induced killer）是目前使用较为广泛的细胞过继免疫治疗方法。CIK细胞治疗主要是通过采集癌症患者自身外周血进行细胞制备,并回输给人体内的过程。然而晚期癌症患者自身机体能力逐渐衰退,制备的免疫细胞活性较低,因此我们可以通过采用异体细胞制备的方式,诱导脐带血中的免疫细胞,通过免疫细胞的识别杀伤作用达到抑制恶性肿瘤增殖的目的。但目前通过一些实验分析,现有的制备工艺培养所得的免疫细胞与人体自身的外周血相比,存在调节性T细胞（Treg,regulatory cell）阳性比例较高的问题,高阳性比例的Treg细胞会抑制机体内抗肿瘤免疫反应,因此本文旨在优化脐带血免疫细胞的制备过程,降低调节性T细胞阳性比例,增强制备的免疫细胞活性。本研究首先对人体本身的外周血细胞进行培养,在结束培养周期后通过流式细胞术检测免疫细胞指标,与原有脐带血免疫细胞制备工艺进行比较,找出原有制备工艺存在的问题,并通过在培养制备过程中加入新的调节因子,达到优化制备工艺的目的。研究方法:首先我们对人体自身外周血提取的淋巴细胞进行细胞培养,培养周期为14天,培养结束后通过流式细胞术检测:CD3+CD56+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、Treg细胞、活化CTL细胞（CTL,Cytotoxic T Lymphocytes）的阳性比例;用原有的制备工艺同样进行一个周期的细胞培养,检测以上几项细胞阳性比例,比较培养相同时间内各项细胞指标的差异,确定原有制备工艺中存在的问题。为了达到优化脐带血免疫细胞制备工艺的目的,我们在培养过程中加入对诱导免疫细胞具有影响作用的细胞因子:IL-15、IL-12、IL-21。我们采用全新的制备方法进行细胞制备和细胞培养。在培养过程中,分别在培养第4天、第7天、第10天、第14天对细胞进行流式检测,对比相同时间内两种不同工艺下各项细胞指标变化。此外,为了考察免疫细胞的免疫能力,我们对制备一个周期后的免疫细胞进行活力检测,分别在0h、24h、48h对细胞的自我增殖情况进行细胞计数和图像采集。结果:1.原有的脐带血制备工艺所得到的免疫细胞与外周血淋巴细胞相比,含有高比例的Treg细胞。2.优化后的制备工艺与原有制备工艺相比,降低了Treg细胞的阳性比例。3.优化后的制备工艺与原有制备工艺相比,提高了CD3+CD56+细胞、CD3+CD4+细胞、活化CTL细胞的阳性比例。4.优化后的制备工艺与原有制备工艺相比,降低了CD3+CD8+细胞的阳性比例。5.优化后的制备工艺制备的免疫细胞自我增殖能力变强。结论:1.优化后的制备工艺降低了Treg细胞的阳性比例,更接近人体本身外周血淋巴细胞。2.优化后的制备工艺提高了免疫细胞的免疫活性。3.优化后的制备工艺提高了免疫细胞的自我增殖能力。
其他文献
目的:分析乳腺癌患者腋窝淋巴结的影像学特征,并将其与病理学进行比较,以研究和评价乳腺癌患者腋窝淋巴结的影像学价值。方法:通过中国医科大学附属盛京医院2018.01-2019.11的110例乳腺癌患者的术前均采用乳腺彩超、乳腺增强CT、乳腺增强MRI、乳腺轴斜位钼靶,回顾分析此110例患者的影像学图像特点与临床一般资料,将收集到的影像学资料与该患者的病理诊断及病理的分子分型进行统计。所有的数据均采用
目的:近年来,随着人们健康意识的不断提高以及计算机断层扫描的广泛应用,同时性多原发肺癌的检出率逐年升高。但是其发病机制、临床分期和治疗方法仍存在争议。本文搜集并分析了42例同时性多原发肺癌患者的临床资料,旨在讨论同时性多原发肺癌患者的一般临床特点和基因突变特点,并与单发肺腺癌临床特点进行比较。方法:搜集2017年11月至2020年4月期间,于中国医科大学附属盛京医院胸外科行胸腔镜手术的42例同时性
目的:表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）极大地改善了EGFR突变阳性非小细胞肺癌（NSCLC）患者的生存和生活质量。然而,许多患者表现出原发/早期耐药。此外,最初对EGFR-TKIs有反应的患者临床结果也各不相同。已有研究表明,EGFR共突变会影响EGFR-TKIs疗效。本研究旨在分析存在EGFR突变并接受过EGFR-TKIs治疗的晚期NSCLC患者共突变的特点,评估不同的共突
目的:本研究旨在探究提前1天应用叶酸及VB12与提前5天在以铂类联合培美曲塞的晚期肺腺癌治疗中,是否存在疗效及毒副作用相关差异。方法:本研究为回顾性分析,共收集符合标准的晚期肺腺癌病例91人,其中50人于培美曲塞联合铂类化疗前1天应用叶酸及VB12,41人于培美曲塞联合铂类化疗前5天应用叶酸及VB12。通过对比分析所收集病例的一般资料、化疗相关毒副反应指标及3年生存率等指标来评估不同时间点应用叶酸
目的:系统评价纳米炭在甲状腺癌手术治疗中的作用。方法:计算机检索Pubmed、Web of science、Cochrane Library、CNKI、万方、维普数据库,检索关键词为纳米碳、纳米炭、甲状腺癌、甲状腺恶性肿瘤、nano carbon,nano-carbon,carbon nanoparticles,nano-carbon parathyroid negative imaging te
目的:探讨正电子发射断层扫描/磁共振成像-弥散加权成像（PET/MRI-DWI）在子宫内膜癌分期中的临床应用潜力。方法:本研究共纳入50例治疗前接受PET（PET/计算机断层扫描[CT]）、PET/MRI-DWI、MRI-DWI检查的子宫内膜癌患者。随访的影像学和组织病理学结果作为金标准。以病理分期为金标准,采用Kappa一致性检验对三个分期的诊断一致性进行评价。采用χ2检验比较三个分期的诊断差异
目的:加速康复外科（enhanced recovery after surgery,ERAS）,成立之初主要是为急救病人提供救助。随着时间的推移,现如今加速康复外科服务对象发生了一定的变化,转变为围手术期病人,并通过系列性优化措施开展相关管理工作,将患者手术的生理创伤、心理创伤最大化降低,提高患者的恢复速度,实现患者生活质量的有效改善,使得患者可以在术后更好更快的恢复。该理念现深入的应用于妇科领域
目的:头颈部鳞状细胞癌（Head and neck squamous cell cancer,HNSCC）是世界范围内常见的癌症,由于大多数患者无临床前期病史,诊断发现时均表现为晚期HNSCC,预后较差。因此,运用生物信息学去研究其生物标志物对HNSCC来说具有重要意义。以往研究中多数针对单基因做肿瘤标志物,在应用上具有较大局限性。本文主要挖掘出关于HNSCC灵敏度和特异性较高的预后风险联合标志物
目的:乳腺癌目前处于威胁女性健康的恶性肿瘤首位。多项报道表明乳腺癌中的内质网应激反应被激活。TMEM16家族与肿瘤间有着密切关系,TMEM16F是TMEM16家族的成员之一。且在前期的研究中发现TMEM16F在乳腺癌细胞质膜上和细胞内都有较高水平表达,且与细胞增殖、迁移能力相关。本研究旨在探索TMEM16F是否通过内质网应激信号通路促进乳腺癌的发生发展。方法:在乳腺癌MCF-7和T47D细胞中,通
目的:乳腺癌（Breast Cancer,BC）是最常见的癌症,也是全世界女性因癌症致死的主要原因。全球新发的100万名癌症病例中显示乳腺癌在女性中很常见,占所有女性癌症的18%,中位年龄是64岁。到2021年,乳腺癌的发病率预计将增加到每100,000名女性中85例。因此,寻找在BC预后中起关键作用的生物标志物具有重要意义。本文基于生物信息学分析,寻找与BC不良预后相关的的分子标志物,并对其进行