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目的:从细胞凋亡的角度探讨NO对利用组织工程化软骨修复软骨缺损的影响。方法:以NO供体硝普钠(Sodium Nitroprusside,SNP)3mmol/L和6mmol/L诱导培养的兔关节软骨细胞凋亡。在加药处理后4,8,12,16,20h,收集细胞样品,利用透射电镜技术、流式细胞术,脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法,观察和分析软骨细胞凋亡现象。结果:在3mmol/L硝普钠诱导下,随着作用时间的延长,透射电镜可观察到细胞核从边集到裂解等超微结构的变化过程;加药12小时后,流式细胞术检测到软骨细胞凋亡率为12.71±3.26%,16小时的软骨细胞凋亡率为32.94±5.48%,20小时的软骨细胞凋亡率为93.47±4.12%,实验组与对照组(0±0.32%)相比,软骨细胞凋亡率增高,差别有显著的统计学意义(P<0.01);加药12小时后,TUNEL染色法检测到软骨细胞凋亡率为10.27±3.12%,16小时的软骨细胞凋亡率为20.16±6.45%,20小时的软骨细胞凋亡率为71.36±12.27%,实验组与对照组 汕头大学医学院硕士研究生学位论文—— ①士0.47%)相比,软骨细胞凋亡率增高,差别有显著的统计学意义 oN刀1人在6mmol/L硝普钠诱导下,电镜观察到细胞出现肿胀、破裂成碎片等坏死变化。结论:1.高浓度的NO可诱导兔关节软骨细胞凋亡,20小时的软骨细胞凋亡率达到高峰。2.关节软骨细胞的凋亡表现为灶性凋亡,并非弥散分布。3过高浓度的NO可引起软骨细胞坏死。4.软骨细胞凋亡率异常增高可能是影响组织工程化软骨修复软骨缺损的原因之一。