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MicroRNAs (miRNAs)是一类内生的非蛋白编码RNA分子,大约18-24核苷酸长,在植物、人类和动物的组织中都有发现,通过与mRNA3端非编码区绑定结合导表现致mRNA退化或者抑制,所以miRNAs在转录后基因调控中扮演着重要作用。miRNAs在癌症检测和键入方面有着重要意义,发展灵敏的、特异性的、定量的、低成本的检测miRNAs的方法是很有必要的。分子信标(MB),一种专门设计的DNA发夹结构,已经被广泛的运用于生物传感器的发展,DNA、RNA、蛋白质、金属离子甚至肿瘤细胞等靶的分析检测。本文主要开展了以下两个方面的工作：一、基于哑铃型探针滚环-剪切-复制技术检测miRNA的研究本章基于哑铃型探针滚环-剪切-复制技术,建立了一种高效的超灵敏免标记检测miRNAs的方法(以let-7a miRNA作为分析物)。该方法通过哑铃探针绑定目标miRNAs环化,进而引发滚环循环放大(RCA)和一个自发的剪切-聚合-取代分子机器过程,生成大量的HRP-DNA模拟酶序列,可与hemin结合,以ABTS2-H2O2为反应底物,产生紫外-可见信号。本方法灵敏度高(检测限可达1zmoD、线性范围宽(可达9个数量级)、特异性号(可检测单碱基错配)、操作简单(仅需一个探针和三种酶),并成功应用于let-7a miRNA实际样品的检测(人体肺部组织总RNA),为1miRNAs用于基因表达和分子诊断,特别是癌症早期诊断提供了一种新方法。二、基于自组装DNA分子机器循环放大技术检测DNA, Ramos细胞、溶菌酶的研究本章基于自组装DNA分子机器循环放大技术,建立了一种高效的检测靶DNA的方法,该方法通过靶DNA与茎环1反应打开茎环,再与茎环2、circlel杂交成环,在DNA聚合酶和DNA内切酶存在下,一边发生滚环复制,一边发生DNA剪切-复制扩增,生成大量HRP-DNA模拟酶,与hemin特异性结合,以ABTS2-H2O2为反应底物,产生紫外-可见信号。从而实验了对靶DNA的免标记的高灵敏检测,并进一步将此方法运用到了Ramos细胞、溶菌酶的检测。