多穗柯中根皮苷的微波辅助法提取纯化及抗氧化活性

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根皮苷属于黄酮类化合物,是一类非常重要的活性成分,在多穗柯中的含量很高。目前对根皮苷提取纯化的研究主要是采用传统的直接水热法,此法投资大,提取效率不高。本研究以多穗柯幼嫩芽头干叶为原料,对微波辅助法提取纯化多穗柯中的根皮苷及其在腊肠抗氧化方面的应用进行了系统的研究。 1.鉴定了多穗柯干叶中根皮苷的化学结构。高效液相色谱法检测多穗柯根皮苷的操作条件为:色谱柱:DiamonsilC<,18>(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇:水=60:40;流速:1mL/min;检测波长:283nm;柱温:25℃;进样量:10μL。多穗柯根皮苷浓度在10μg/mL~100μg/mL范围内呈现良好的线性相关性。质谱法检测多穗柯根皮苷的操作条件为:流动相:甲醇:水=60:40:ESI离子源;离子源喷雾电压:4.5kV;毛细管电压:45V:毛细管温度:200℃;鞘气N2流速:40个单位;扫描范围(m/z):50~800;流速:1mL/min。 2.采用微波辅助法和水热法提取多穗柯中的根皮苷,探讨了不同提取时间、料液比、温度以及粒度等条件对提取率的影响,结果显示在得到同样提取率的情况下,微波辅助法所消耗的时间从水热法的60min减少到20min,提取效率提高66.7%。水热法提取多穗柯芽头干叶中的根皮苷的适宜条件为:以1:20的料水比,在100℃条件下提取60min,提取率可达85.29%±0.99%,多穗柯根皮苷的含量为4.93%±0.34%;微波辅助法提取多穗柯芽头干叶中的根皮苷的适宜条件为:在微波消解系统中以1:8的料水比,80℃温度下提取20min,提取率可达92.39%±0.99%,多穗柯根皮苷的含量为5.34%士0.21%。 3.多穗柯根皮苷粗提液的纯化分絮凝和吸附两步。絮凝的适宜条件为:以聚合氯化铝为絮凝剂,用量为多穗柯干叶重量的10%,絮凝温度为55℃,提取液的pH值为7.5,絮凝时间为40 min。吸附的适宜条件为:选用ADS-7型树脂、15mm×200mm型吸附柱,多穗柯根皮苷上样液的浓度为8.354mg/mL,上样液的量为4倍树脂柱体积,吸附流速为1.0mL/min;洗脱的适宜条件为:用8倍树脂柱体积的80%的乙醇以1.0mL/min的流速洗脱,分离纯化后多穗柯根皮苷的纯度可达到96.24%。 4.多穗柯根皮苷具有与’rBHQ相接近的抗氧化活性,是极具开发潜力的新型天然食品抗氧化剂。通过定期取样测定腊肠的POV值和TBARS值,结果发现当多穗柯根皮苷的添加量为0.100%时,其抗氧化能力高于同等条件下添加量为0.025%的TBHO。
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