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背景:沉默信息调节因子2(sir2)是最初在芽殖酵母中发现的一种抗衰老基因，其编码的小分子蛋白Sirt2具有NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶活性，与寿命延长相关。SIRT1是Sirt2在哺乳动物中同源性最高的一个类似物，它参与细胞的能量代谢、增殖衰老、炎性反应、神经保护、肿瘤形成等多个过程。但是关于SIRT1在肿瘤中的研究，却存在很多争议性——SIRT1在肿瘤中发挥促癌作用还是抑癌作用？SIRT1定位于细胞核内还是细胞浆内？SIRT1亚细胞定位是否与核浆穿梭有关？目前对SIRT1的这些争议性研究的具体机制尚不明确，因此有必要进行深入探讨。有报道指出，磷酸化能够调控SIRT1的去乙酰化活性和核浆穿梭，但是关于Phospho-SIRT1在肿瘤中的研究较少见，因此我们着重探讨了Phospho-SIRT1在结直肠癌中的表达情况及亚细胞定位情况。目的:本课题通过研究SIRT1、Phospho-SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达水平及亚细胞定位情况，以及SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的转录水平，分析SIRT1、 Phospho-SIRT1与结直肠癌各临床病理学特征之间的关系，分析Phospho-SIRT1与SIRT1之间的相关性，探讨磷酸化在结直肠癌中发挥的作用。方法:采用免疫组织化学方法和Western blot方法检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中SIRT1和Phospho-SIRT1蛋白表达情况及亚细胞定位情况；采用Real-Time PCR方法检测结直肠癌组织和癌旁正常组织中SIRT1mRNA水平。结果:1. SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中均完全定位于细胞核内，无胞浆定位；SIRT1在癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织，并与患者的低年龄、高TNM分期、突变型P53蛋白缺失相关。2. Phospho-SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中均完全定位于细胞核内，无胞浆定位；Phospho-SIRT1在癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织，且与Ki67蛋白相关。3. Phospho-SIRT1与SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达均呈正相关，Phospho-SIRT1/SIRT1比值在癌组织中高于癌旁正常组织。4. SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的转录水平无明显差异。结论:1. SIRT1在结直肠癌组织中呈高表达，并与患者的低年龄、高TNM分期、突变型P53蛋白缺失相关，即SIRT1在癌组织中既是有利因素也是不利因素，提示SIRT1在结直肠癌形成过程中可能具有两面性。2. Phospho-SIRT1在结直肠癌组织中呈高表达，并与Ki67蛋白相关，即Phospho-SIRT1与细胞的增殖有关，提示Phospho-SIRT1可能参与了结直肠癌的形成。3. Phospho-SIRT1与SIRT1在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达均呈正相关，提示Phospho-SIRT1可能代表了SIRT1在组织中的作用；Phospho-SIRT1/SIRT1比值在癌组织中高于癌旁正常组织，提示SIRT1的磷酸化在结直肠癌中可能起到了促进肿瘤形成的作用。4. SIRT1和Phospho-SIRT1均定位于细胞核内，无胞浆定位情况，即实验未观察到磷酸化对SIRT1亚细胞定位的影响，可能Phospho-SIRT1并不能代表SIRT1的核浆穿梭部分。5. SIRT1mRNA在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达水平无明显差异，说明SIRT1蛋白的变化水平与其转录水平无相关性，提示转录后水平在SIRT1的调节中可能发挥了重要作用。