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在植物中磷(P)是不可或缺的常量营养元素,不仅是植物细胞的主要组成成分,还参与细胞中一系列生理生化反应。在自然界中,植物为了增加磷的吸收利用效率从而进化出一系列适应性机制。MicroRNA(miRNA)通过在转录水平调控基因的表达,能够降解靶基因或抑制靶基因翻译等过程以调节植物生长发育和应对生物及非生物胁迫等过程。在关于植物响应低磷胁迫的近期研究中,miRNA被发现在植物磷代谢及磷平衡中起到了重要作用,但在大豆中鲜有研究报道。因此,本研究拟开展gma-miR156和gma-mi和R166基因调控大豆磷代谢及磷平衡的功能研究。获得主要结果如下:1.对不同大豆基因型和农杆菌浓度对农杆菌介导大豆子叶节遗传转化效率的影响进行研究,发现天隆1号和Williams 82两个大豆品种均易受不同浓度的农杆菌侵染,外植体GUS瞬时表达率在90%左右,且在农杆菌浓度为1.0(OD650)时外植体GUS瞬时表达率达到最高,分别为96.12%和97.51%,同时遗传转化效率也较高,分别为4.37%和3.88%。综合以上结果发现天隆1号是较好的大豆遗传转化受体材料,其在农杆菌浓度为1.0(OD650)时的遗传转化效率较高。2.qRT-PCR实验发现,gma-miR156b和GmSPL9基因在大豆中均受到不同程度的低磷胁迫诱导表达,且gma-miR156b与GmSPL9基因的表达模式呈负相关关系,说明GmSPL9可能是gma-miR156b的靶基因。gma-MIR156b过表达转基因大豆毛状根的无机磷含量极显著高于空载对照,gma-MIR156b过表达转基因拟南芥和大豆的侧根变多、根冠比变大和根中无机磷含量升高,同时gma-MIR156b过表达转基因拟南芥叶片中无机磷含量升高,而GmSPL9过表达转基因拟南芥叶片中无机磷含量降低,它们呈负相关关系。以上结果表明gma-miR156b和GmSPL9可能参与大豆响应低磷胁迫的一系列生理生化过程。3.qRT-PCR实验发现,在大豆的根和叶片中gma-miR166a基因响应低磷胁迫负向表达,gma-MIR166a过表达转基因大豆毛状根的无机磷含量极显著低于空载对照,gma-MIR166a过表达转基因大豆的侧根变少、根冠比变小、根中无机磷含量降低和叶片中花青素含量升高。以上结果表明gma-miR166a基因可能在大豆响应低磷胁迫的调控网络中发挥作用。