近年来,中国马业迅速发展。随着马术及速度赛马比赛越来越频繁,马匹流动性增加,给马匹疾病防控带来巨大挑战,尤其是马流感的防控。马流感的监控是国际运动马匹运输前后必检项目,为马疫病防控的重中之重。近年,A型流感病毒跨物种传播问题已引发学者及公共卫生人员的广泛关注。2005年,H3N8亚型马流感病毒（Equine influenza,EIV）跨物种传播并感染犬,引发犬流感流行。10年前,禽源H3N2亚型犬流感病毒（Canine influenza virus,CIV）出现并逐渐在全球流行,于近几年间跨物种传播并感染猫、豚鼠等动物。而CIV是否已可反向感染马,尚未知。广东省为我国CIV最早发现地区,犬数量全国前三,马术俱乐部数量全国第十,且存在活禽市场这一A型流感病毒天然混合库,犬、马、禽接触频繁,存在相互传染的可能性。因此,本研究对广东省马血液CIV抗体进行系统的流行病学调查和分析,并对其感染马的可能性及其特点进行探究。本研究通过HI及抗体中和实验,对广东省马群H3N2亚型CIV抗体进行血清学调查。研究发现马血清存在CIV抗体,总阳性率为17.5%,最高抗体滴度达1:640。统计学分析发现:马血清CIV抗体存在地域差异,广东省显著高于内蒙和新疆;存在种属差异,矮马阳性率显著低于其他品种;存在年龄差异,小于4岁马匹阳性率显著低于其他年龄马匹。表明马可能存在CIV天然感染且与地域、品种及年龄有关,应引起马流感防控及CIV跨种传播研究人员的高度重视。为进一步探索CIV感染马的可能性,本研究通过CIV感染马源细胞的CPE观察、TCID₅₀的检测、病毒的细胞内免疫荧光检测及病毒复制滴度测定,并与EIV感染细胞比较,研究其感染特点。结果显示:CIV与EIV一致,倾向结合α2,3-SA唾液酸受体,表明其存在感染马的可能性;CIV在马源细胞上可形成与EIV相似的CPE,且48h最明显;CIV感染马源细胞24 h可清晰呈现CIV的免疫荧光染色,但其感染程度略低于EIV。CIV感染马源细胞,于48 h上清病毒滴度最高,而EIV则于24 h复制滴度最高。这表明CIV可感染马源细胞并在其内复制,应引起马流感防控人员高度关注。总之,本研究首次对广东省马匹CIV抗体水平进行了全面调查和分析,发现广东省马匹可能存在CIV天然感染且与地域、马匹品种及年龄有关。CIV细胞感染实验,发现其能感染马源细胞并复制,但其感染和复制能力弱于EIV,应引起马流感防控人员的高度重视。马匹是否存在CIV天然感染及其感染特点还有待马匹CIV攻毒实验进一步探究。本研究为广东省"无规定马属动物疫病区"马流感防控提供支撑,并为我国马匹流感防控及CIV跨种传播研究提供参考。