柴郁地仙方联合二甲双胍对多囊卵巢综合征并发抑郁大鼠的作用机制研究

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目的:1.通过观察脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征模型大鼠行为学表现、神经内分泌改变和慢性束缚应激对多囊模型动物的影响,探讨多囊卵巢综合征并发抑郁症的发作机理以及环境刺激对多囊卵巢综合征的影响。2.对比柴郁地仙方、二甲双胍和联合用药对多囊卵巢综合征并发抑郁模型大鼠的药理效应,从HPO轴、雄激素水平、胰岛素水平、中枢单胺神经递质功能等方面,探讨药物对多囊卵巢综合征并发抑郁的作用机制。方法:通过对雌性大鼠皮下注射脱氢表雄酮28天,诱导建立多囊卵巢综合征模型,在此基础上同时给予慢性束缚应激,复制多囊卵巢综合征并发抑郁模型大鼠。实验动物将分成6组:空白对照组、多囊组、模型组、柴郁地仙方组、二甲双胍组、联合治疗组,应激过程灌胃给药。通过对大鼠阴道脱落细胞、体质量变化、旷场运动路径、强迫游泳不动时间和悬尾不动时间的观察,评价大鼠动情周期和行为学改变;通过ELISA法对大鼠血清GnRH、LH、FSH、E2、T、A2、INS及下丘脑、海马5-HT、DA、NE含量进行检测;采用苏木精-伊红染色法,染色后镜下观察大鼠卵巢组织形态及各级卵泡情况。结果:1.与空白对照组比较:多囊组、模型组的大鼠旷场试验水平移动距离、直立次数、中央区域停留时间、中央区域水平移动距离占比及进入中央区域次数降低,粪便颗粒数增多,强迫游泳试验和悬尾试验不动时间增加;卵巢中的窦状卵泡比例、黄体比例降低,闭锁卵泡比例升高,出现囊状卵泡;下丘脑、海马脑组织的DA、5-HT含量降低,NE含量升高;血清中的GnRH、LH、T、A2、INS含量升高,FSH、E2含量降低;多囊组体质量升高(P<0.01)。与多囊组比较:模型组体质量下降,胰岛素水平升高(P<0.01)。2.柴郁地仙方对模型组大鼠具有改善抑郁行为,调节下丘脑、海马脑组织的DA、5-HT、NE水平,稳定GnRH、LH的分泌,上调E2、FSH含量,降低雄激素、胰岛素水平,改善卵泡发育的作用(P<0.05,P<0.01)。3.二甲双胍具有提高模型组大鼠旷场水平移动距离、直立次数,减少排泄次数,降低强迫游泳、悬尾试验的不动时间,调节下丘脑、海马脑组织的DA、5-HT、NE含量,稳定GnRH、LH分泌,上调E2、FSH含量,降低雄激素、胰岛素含量的作用,具有改善卵泡发育效果(P<0.05,P<0.01)。4.柴郁地仙方与二甲双胍联用在改善模型组大鼠HPO轴功能,降低高雄激素血症、高胰岛素血症,改善抑郁行为、中枢单胺神经递质功能,调节卵泡发育上具有协同作用,尤其在调节下丘脑5-HT、海马NE、血清T水平上,效果优于单纯使用柴郁地仙方或二甲双胍(P<0.05,P<0.01)。结论:1.脱氢表雄酮能够诱导多囊卵巢综合征模型大鼠,影响大鼠神经内分泌功能,使其具有抑郁样行为表现,提示多囊卵巢综合征的抑郁症发生可能来源于自身神经内分泌功能紊乱,慢性应激可以加重多囊卵巢综合征高胰岛素血症。2.柴郁地仙方能够提高多囊卵巢综合征并发抑郁模型大鼠自发活动、探索欲望,改善消极、绝望行为以及紧张、焦虑情绪,其机理与调节中枢的DA、5-HT、NE单胺神经递质水平有关;能改善模型大鼠卵泡发育,其作用机制与稳定HPO轴、降低雄激素、胰岛素含量有关。3.二甲双胍能提高多囊卵巢综合征并发抑郁模型大鼠自发活动能力、探索欲望,改善消极、绝望行为,改善卵泡发育,其作用可能通过调节中枢5-HT、DA、NE神经递质水平、HPO轴功能及改善高雄激素、高胰岛素水平实现。4.柴郁地仙方与二甲双胍联用对于改善多囊卵巢综合征并发抑郁病理状态具有协同作用。
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