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狂犬病是一个重要的全球性公共卫生问题。我国狂犬病死亡人数高居世界第二位，位居我国重要传染病的榜首。近年来由于养犬数量的增加，狂犬病成为严重危害我国公共卫生安全的问题。本实验构建了一株可以在哺乳动物细胞内表达RV糖蛋白的杆状病毒，并对其作为新一代口服基因疫苗的抗原制备进行了探索。本实验利用RV兽用疫苗ERA株感染BHK细胞，以RT-PCR扩增ERA株G基因，将其克隆到pMD-18T载体上，用EcoRⅠ/PstⅠ酶切T-G，纯化回收目的基因，亚克隆到经改造后，含有巨瘤病毒启动子(CMVP)的杆状病毒转移载体pAcSG2上，构建了表达质粒pAc-G。经测序鉴定，目的基因与ERA株G基因序列完全相同。使用BD BaculoGold Transfection Kit，将pAc-G与线性化的杆状病毒DNA在Sf9细胞内进行同源重组，得到重组杆状病毒，经PCR鉴定，病毒DNA内含有ERA株G基因，用免疫荧光实验也检测到了GP的表达。经空斑纯化，得到高效表达GP的重组杆状病毒，病毒滴度为4.75×10~7pfu/ml。重组杆状病毒感染哺乳动物BHK细胞，不见有细胞病变出现，但是可以检测到GP的表达。说明本实验所得到的杆状病毒，可以进入哺乳动物细胞内但不会出现病毒复制，也不会对哺乳动物细胞造成伤害，但是可以表达RV糖蛋白，从而为进一步研制狂犬病口服基因疫苗抗原奠定了基础。