拔牙位点保存用CS/HAC复合温敏凝胶的构建及体外表征

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目的牙齿拔除后由于牙槽骨进行性吸收导致牙槽嵴萎缩造成种植体植入困难,也会进一步影响种植修复后的美观与功能,因此如能在牙齿拔除术后、种植治疗之前进行拔牙位点保存,将能有效改善种植修复效果。现有位点保存材料体内成型能力与力学强度不可兼得。为获得兼具体内成型能力以及优良理化性能的位点保存材料,本课题拟构建一种新型复合材料—负载碳纳米管/纳米羟基磷灰石的壳聚糖复合温敏凝胶。方法1.对原始多壁碳纳米管(multi-walled carbon nanotubes,MWNT)进行多步纯化处理,即依次采取高温煅烧、稀盐酸搅拌、混酸回流、抽滤冲洗并进行长度筛选,真空干燥后得到具有合适长度并分散良好的氧化多壁碳纳米管(oxidized multi-walled carbon nanotubes,O-MWNT),并通过扫描电镜、傅里叶红外光谱对多壁碳纳米管进行表征。2.将O-MWNT超声分散于稀盐酸中,利用原位沉积方法在O-MWNT悬液中依次加入羟基磷灰石前体溶液,钙、磷离子在纳米管的端口及侧壁缺陷处自组装形成黑色沉淀。离心、冲洗、冻干,通过扫描电镜、傅里叶红外光谱和X衍射光谱对碳纳米管/羟基磷灰石(CNT/HA,简称HAC)无机复合物的形貌和成分进行检测。3.将质量体积分数(w/v)为1.67%、3.33%、6.67%mg ml-1的HAC无机复合物加入到壳聚糖(chitosan,CS)溶液中,超声均匀分散后逐滴加入β-甘油磷酸钠(β-glycerophosphate sodium,β-GP)溶液,获得分散均匀的负载HAC的CS/GP复合物。37℃恒温下待复合物由溶胶变为凝胶状态后,检测复合体系在骨组织工程应用方面的材料学性能,对各组复合支架进行评价并最终确定有利于骨组织工程应用的材料构成。结果1.经过多步纯化处理制备出的O-MWNT,扫描电镜显示碳纳米管端口被有效打开,长度变短,同时侧壁形成大量缺陷,管壁变粗糙;红外光谱检测碳纳米管表面有羧基的形成。2.氧化多壁碳纳米管表面自组装形成复合物,X衍射光谱、红外光谱及电感耦合等离子体发射光谱均表明有羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)的形成;扫描电镜观察到碳纳米管表面形成的羟基磷灰石为纳米级别。3.HAC加入到壳聚糖温敏凝胶体系中,单纯的壳聚糖的成胶时间、孔隙率、抗压强度、降解率分别为18min、92%、0.138MPa、92%,加入CNT和HAC后成胶时间、孔隙率和降解率均逐渐降低,抗压强度逐渐升高(CS/HAC/20除外)。HAC浓度为10mg/ml时(CS/HAC/10),复合体系成胶时间、孔隙率、抗压强度和降解率分别为12min、84%、0.441 MPa、60%;HAC浓度为20mg/ml时(CS/HAC/20)成胶时间为14.5min,较CS/HAC/10有所增加,孔隙率为74%,机械强度为0.29MPa,较CS/HAC/10有所降低,降解率为56%。结论1.多步纯化方法能够在有效去除杂质获得纯化MWNT的同时,打开和切断碳纳米管并且产生大量的管壁缺陷,最终形成具有较高羧基含量、长度大于1μm、分散性良好的O-MWNT。2.羟基磷灰石前体溶液能在氧化多壁碳纳米管表面原位沉积自组装形成HAC无机复合物。随着沉积时间延长,碳纳米管表面沉积物增多,体积增大,但形成的羟基磷灰石仍可维持纳米结构。3.浓度为10mg/ml的HAC无机复合物加入到壳聚糖溶液中,能够在不影响成胶并保证一定孔隙率的前提下,提高支架的机械性能,缩短临床操作时间,使复合材料达到可控的降解速率。负载HAC的温敏凝胶具有良好的成型性,并具有较好的机械性能,在骨组织修复材料学领域具有良好的应用前景。
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