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背景与目的:非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）目前在全球患病人数不断增加,非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是其严重类型。NAFLD/NASH是心脑血管疾病、代谢综合症等的危险因素,也导致肝硬化和肝癌,给社会造成了沉重疾病负担。NAFLD特别是NASH目前发病机制不明。脯氨酰内肽酶（PREP）是由约700个氨基酸残基组成的丝氨酸蛋白酶,在肝脏中活性较高。我们前期体内体外实验均证实肝细胞脂肪变时伴PREP活性升高,体外实验证实抑制PREP活性可抑制肝细胞脂肪变,提示抑制PREP对NAFLD发展可能有保护作用。迷迭香酸是一种多功能天然的酚酸化合物,既往认为其具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤作用以及肝保护作用。丙戊酸（VPA）及其钠盐是合成化合物,是目前世界上最常用的抗癫痫药物,但多项报告称长期服用丙戊酸对人体肝功能的有一定损害作用。迷迭香酸和丙戊酸均有显著PREP的抑制剂活性,它们是否和如何影响NAFLD发展目前未见报道。本研究尝试利用PREP基因敲除小鼠(PREPgt小鼠,背景小鼠为C57BL/6J小鼠)、高脂饮食诱导的NAFLD模型和具PREP抑制功能的迷迭香酸和丙戊酸干预,观察PREP抑制对NAFLD发展的影响,为PREP抑制剂在NAFLD中的开发利用提供初步的理论基础。方法:将24只野生型（wild type,WT）C57BL/6J小鼠和21只PREPgt小鼠随机分为正常饮食（low fat diet,LFD）野生型组（LFD-WT,10只）、高脂饮食（high fat diet,HFD）野生型组（HFD-WT,14只）、正常饮食PREP敲除组(LFD-PREPgt,9只)和高脂饮食PREP敲除组(HFD-PREPgt,12只)。进行1周的适应性喂养,LFD组小鼠予以标准普通饲料喂养,HFD组小鼠予以高脂饲料喂养。小鼠均饲养16周。记录各组小鼠平均体质量、肝指数、和附睾指数,检测血清生化指标、肝组织脂肪变、炎症等变化情况。雄性C56BL/6J小鼠进行1周的适应性喂养后,分为对照组,模型组和治疗组。对照组饲喂标准饲料,模型组饲喂高脂饲料,8周后治疗组给迷迭香酸（迷迭香酸60mg/kg灌胃,每天一次）或丙戊酸（0.4%丙戊酸钠饮用水）,继续干预8周后,处死动物。记录小鼠平均体质量变化和肝指数,检测血清生化指标、肝组织脂肪变、炎症等变化情况,以及与脯氨酰内肽酶表达与活性的变化。结果:（1）相比于正常饲料喂养的LFD-WT组和LFD-PREPgt组小鼠,予以高脂饲料喂养的HFD-WT组和HFD-PREPgt组小鼠在体质量、睾脂指数以及肝指数方面,ALT、AST、TC、TG、LDL、FBG以及Insulin方面,均有显著的升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;与LFD-WT组和LFD-PREPgt组相比,HFD-WT组和HFD-PREPgt组小鼠的NAS积分显著增高,差异有统计学意义（P<0.05）,且与HFD-WT组相比,HFD-PREPgt组小鼠的NAS积分明显更低,差异有统计学意义（P<0.05）;HFD-WT组和HFD-PREPgt组高倍视野下F4/80阳性表达细胞数量明显多于LFD-WT组和LFD-PREPgt组,且HFD-PREPgt组较HFD-WT组阳性表达数明显减少。（2）迷迭香酸干预实验中,高脂组PREP m RNA RQ值为（2.01±0.35）,蛋白活性为（470.10±50.86）p M/mg*min,与对照组相比显著升高,迷迭香酸干预后PREP m RNA为（1.21±0.22）,PREP活性为（269.75±34.32）p M/mg*min,与高脂组相比均显著降低,但三组蛋白含量无显著性差异。迷迭香酸组肝指数为（4.51±0.30）%,与高脂组无显著差别,而附睾指数为（3.88±1.10）%,相比于高脂组的（2.94±1.30）%有升高,附睾脂肪相对重量增加;迭香酸组LDL、ALT、AST、ALP水平较高脂组有显著下降;迷迭香酸干预后小鼠较高脂组肝脏炎症和脂肪变等情况未见明显改善,NAS评分与高脂组无明显差异;（3）丙戊酸钠干预实验中,高脂组PREP蛋白含量为对照组的（0.67±0.08）倍;高脂组蛋白活性为（467.94±75.69）p M/mg*min,较对照组显著升高;丙戊酸钠干预后,PREP活性为（379.55±42.33）p M/mg*min,相比于高脂组降低,而与对照组无显著性差异,但丙戊酸钠干预组的PREP m RNA为（0.61±0.09）,与对照组、高脂组相比均显著降低。丙戊酸钠组肝质量、肝指数与高脂组相比均显著降低,差异有统计学意义。高脂组小鼠LDL为（0.54±0.08）mmol/L,ALT为（35.30±12.52）U/L,与对照组相比均显著升高;丙戊酸钠组小鼠LDL为（0.63±0.08）mmol/L较高脂组更高,但ALT为（26.29±10.59）U/L,则低于高脂组。高脂组小鼠肝脏出现脂肪变性、炎症明显,经丙戊酸钠干预后均显著改善,NAS评分进行评价时,发现丙戊酸钠组较高脂组脂肪变、炎症和NAS积分均改善。结论:PREP基因敲除可有效预防高脂喂养NAFLD模型小鼠的肝脏炎症和脂肪变性;迷迭香酸抑制PREP活性对NAFLD模型小鼠肝功能和脂代谢呈有限的改善作用,而丙戊酸钠抑制PREP活性显著改善NAFLD模型小鼠肝脏脂肪变和炎症。