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目的分析经典型21-羟化酶缺乏症基因型与临床表型之间的关系,了解其基因突变频率。对象与方法收集2011年10月至2016年1月期间就诊于重庆医科大学附属儿童医院临床诊断为经典型21-OHD并行21-羟化酶基因检测的患者共132例,大部分来自西南地区。21-羟化酶基因检测仅使用PCR-ACRS联合限制切割方法和Sanger测序法,与PubMed标准序列对比,CAH版本:NC-000006.11,GI:2224589818。将基因诊断阳性者按基因突变严重程度分组:重度突变组,包括携带重度突变的纯合突变及其之间的复杂杂合突变的患儿;中度突变组,包括携带I173N纯合突变及I173N与重度突变的复杂杂合突变的患儿;轻度突变组,包括为携带轻度突变的纯合突变及含有轻度突变的复杂杂合突变的患儿。结果在132例患儿中检测到存在异常基因突变者共117例,仅为无意义基因突变者8例,未检测出基因突变者7例。除无意义基因突变外共检测到36种基因突变,其中可以从既往文献中查询到的已知致病突变基因共16种,突变频率为80.3%(212/264),既往无报道的未知突变基因共20种,是否影响21-羟化酶活性情况不详,突变频率仅为11.7%(31/264)。基因诊断阳性率仅为65.2%。重度突变组中,54例为失盐型患儿,7例为单纯男性化患儿;中度突变组中,1例为失盐型患儿,20为单纯男性化患儿;轻度突变组中4例全部为单纯男性化患儿。重度突变组的中位数初诊年龄(0.1岁)显著低于中度突变组(3.6岁)和轻度突变(3.15岁),中度突变组与轻度突变中位数组初诊年龄无显著差异;重度突变组中失盐表现的患儿比例(88.5%)显著高于其他两组(5%,0)。最常见的基因突变为I2g(37.9%)及I173N(13.6%),其次为Q319X(6.4%),R357W(5.7%)。失盐型患儿中检出率最高的为I2g(47.6%);在单纯男性化患儿中检出率最高的2种突变为I173N(34.7%)及I2g(21.4%)。结论按基因突变严重程度的分组方法,基因型能有效预测失盐型诊断及单纯男性化型诊断,其阳性预测值分别为,失盐型88.5%,单纯男性化型95.2%,能帮助临床分型及指导治疗,提供遗传咨询。本研究132例经典型21-OHD最常见的基因突变为I2g(37.9%)及I173N(13.6%),其次为Q319X(6.4%),R357W(5.7%),与我国上海地区点突变基因分布频率相似,而与北京、新疆、台湾地区有所不同。本研究仅使用PCR-ACRS联合限制切割方法和sanger测序法,且仅报告碱基点突变及其导致的氨基酸改变,诊断阳性率低,对临床指导意义有局限。联合多重连接依赖式探针扩增技术(MLPA)检测基因的大片段缺失情况,并进一步验证新发突变的对21-羟化酶活性的影响程度,能提高基因诊断阳性率,提高临床参考价值。