曲古抑菌素A对胃癌BGC 823细胞增殖及凋亡的影响及其机制探讨

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目的:研究曲古抑菌素A (Trichostatin A, TSA)对于人胃癌BGC823细胞的增殖以及凋亡的影响,探讨TSA抗肿瘤的作用机制,为胃癌的临床药物治疗提供实验基础。方法:体外培养人胃癌BGC823细胞,CCK-8法测定不同浓度以及不同干预时间作用下胃癌BGC823细胞的增殖抑制率。流式细胞术检测不同浓度TSA对人胃癌BGC823细胞凋亡率的影响。实时荧光定量PCR测定人胃癌BGC823细胞中survivin、β-catenin基因表达水平的改变。结果:1.TSA对于人胃癌BGC823细胞的增殖抑制影响CCK8法检测结果:TSA可以抑制人胃癌BGC823细胞的增殖。随着TSA其浓度水平的增高(100nmol/L、200nmol/L、400nmol/L),及TSA作用时间的延长(12h、24h、48h),TSA对人胃癌BGC823细胞的抑制率会逐渐提高,呈剂量依赖性及时间依赖性(p<0.05)。作用时间为12h时,将TSA浓度分别设置为Onmol/L、100nmol/L、200nmol/L 400nmol/L,CCK8法增殖抑制率分别为(0.001+0.034)%,(26.188+0.209)%,(41.326±0.166)%,(45.476+0.513)%,增殖抑制率随浓度增大逐渐增加。TSA浓度为400nmol/L时,分别作用12h、24h、48h,其抑制率分别是(45.476+0.513)%,(80.014+0.564)%,(82.246+0.676)%,细胞增殖抑制率随时间的延长而逐渐加大。2.TSA诱导人胃癌BGC823细胞的凋亡TSA作用人胃癌细胞48 h,当其浓度分别为100nmol/L、200nmol/L、400nmol/L时,胃癌BGC823细胞凋亡率分别是(1.752+0.011)%,(1.865+0.013)%,(33.996+0.217)%,(44.503±0.522)%,随着药物浓度的升高而增大。3.TSA对人胃癌BGC823细胞survivin、β-catenin mRNA表达水平的影响当TSA浓度为分别为Onmol/L、100nmol/L、200nmol/L、400nmol/L,干预48小时后,实时荧光定量PCR结果示:随着TSA浓度的增大(Onmol/L、100nmol/L、200nmol/L 400nmol/L),survivin、β-catenin mRNA的表达水平呈下调趋势,且其表达水平与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.TSA可以抑制人胃癌BGC823细胞的增殖,且有浓度及时间依赖,即随着TSA干预浓度的逐渐增高以及作用时间的延长,TSA对于人胃癌BGC823细胞增殖抑制率会逐渐提高,呈剂量依赖及时间依赖(p<0.05)。2.TSA干预体外培养的人胃癌BGC823细胞48h,随着TSA浓度的增加,其凋亡率增大,TSA可诱导人胃癌BGC823细胞产生凋亡3.TSA对于人胃癌BGC823细胞的增殖抑制及凋亡作用可能与下调surviving、β-catenin基因的表达水平相关。
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