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海洋真菌是当今海洋源天然产物研究的热点材料,其发酵产生的化合物中发现了许多新化合物和有生物活性的化合物。主要的化合物类型有聚酮类、生物碱类、萜类、肽类、甾体类等,有许多化合物也表现出显著的抗菌、抗肿瘤、抗氧化和杀虫等多种生物活性,它们对新型药物的开发显然有重要意义。本研究为了在海洋真菌中寻找有杀虫活性的天然产物,在海南近海区采集并纯化了几株海洋真菌。通过其发酵产物对埃及伊蚊幼虫的杀虫活性实验筛选了2株活性和发酵物产量均较好的实验菌株。将高活性实验菌株扩大发酵,分离其次级代谢产物,最后测定单体化合物结构和其杀虫活性。1.菌株的纯化和杀虫活性筛选使用加有青霉素和链霉素的海水PDA培养基,进行稀释涂布和平板划线等微生物操作方法进行海洋真菌的纯化。将纯化的10株海洋真菌小批量静置发酵,乙酸乙酯萃取其发酵产物。以埃及伊蚊四龄幼虫测定菌株发酵物的杀虫活性。对两株高活性菌株(2号菌和10号菌的发酵提取物在36 h的LC50值分别为88.68和108.92 μg/mL)进行菌种鉴定,2号菌为短柄青霉菌,10号菌为中赭曲霉菌。2.短柄青霉菌次级代谢产物的分离及其化合物的杀虫活性扩大发酵培养该菌株,乙酸乙酯萃取其发酵产物,以硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、重结晶和薄层色谱分析等方法进行化合物分离,共得到7个单体化合物。利用波谱学分析技术(1H NMR,13C NMR,ESI-MS)鉴定出化合物结构,包括2个甾体类、2个生物碱、2个大环内脂。其中化合物P6为新化合物,单体化合物的杀虫活性测试结果为,化合物P2和P5的LC50在36 h分别为443.19和209.71 μg/mL。其余化合物没有杀虫活性。3.中赭曲霉菌次级代谢产物的分离及其化合物的杀虫活性扩大发酵培养该菌株,甲醇提取其次级代谢产物,减压浓缩及乙酸乙酯萃取得乙酸乙酯浸膏。以硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、重结晶和薄层色谱分析等方法进行化合物分离,共得到5个单体化合物。利用波谱学分析技术鉴定出化合物结构。化合物杀虫活性实验结果表明这5个化合物均没有杀虫活性。本文经过海洋近海真菌的采集及纯化、杀虫活性菌株筛选和菌种鉴定得到2株高活性真菌。经过发酵产物分离,结构鉴定和单个化合物杀虫活性测试,得到两个具有一定杀虫活性的化合物和一个新化合物。本实验为从海洋发现生物杀虫剂先导化合物提供了支持且丰富了天然产物库,为实验室对海洋微生物天然产物的研究提供了经验。