【摘 要】
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为研究黄颡鱼感染拟态弧菌(Vibrio mimicus)的病理损伤特征及病原菌在鱼体内的分布规律,以1.0×106 CFU·mL-1浓度菌液浸浴感染黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)30 min,感染
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为研究黄颡鱼感染拟态弧菌(Vibrio mimicus)的病理损伤特征及病原菌在鱼体内的分布规律,以1.0×106 CFU·mL-1浓度菌液浸浴感染黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)30 min,感染后Oh、4h、8h、16h、24h、36h、48h、60 h、72 h剖杀取样,石蜡切片,HE染色观察病理损伤,qPCR检测病原菌在体内的动态分布。结果显示,被感染鱼的主要临床症状为精神沉郁,厌食,体表出血性溃疡,肛门红肿;剖检见鳃与肝点状出血,部分鱼见脾、肾肿大,肝脏苍白色,淡红色腹水,腹膜出血,鳃丝苍白。病理组织学上,皮肤肌肉、鳃、肠道出现病变时间最早,其中皮肤肌肉病变最为严重。16h表皮坏死脱落,真皮轻度出血,鳃丝出血,肠绒毛水肿;24-48h真皮严重出血,肌间隙增宽,炎症细胞浸润,肌纤维变性、坏死;鳃丝毛细血管扩张淤血、出血,上皮细胞肿胀,局部坏死,脱落,肠黏膜上皮与固有膜灶性分离;48-72h表皮与真皮层坏死,脱落,其下肌纤维溶解坏死,其内见多量病原菌:鳃小片毛细血管出血,上皮细胞灶性水肿浮离或坏死脱落;感染后36 h肾脏出现淤血,与肾小球肿大,肝、脾、肾与心48 h后出现不同程度的淤血、出血,变性,局灶性的坏死和炎症细胞浸润。病原菌的qPCR检测显示细菌首先出现于鳃、肠与皮肤,感染后4h即在鳃、肠道、皮肤肌肉中检测到细菌,检出量分别为1.3×102 CFU·mg-1,2.6×102 CFU·mg-1,4.7×102 CFU·mg-1。肠道中带菌量随后逐渐降低,而鳃与皮肤肌肉中细菌含量随感染时间延长而增加,72 h鳃中细菌含量达到4.7×103 CFU·mg-1,皮肤肌肉中细菌含量达到4.5×107 CFU·mg-1,其含量显著高于其他器官。感染后24 h肾脏中检测出病原菌,感染后36 h肝、脾、心中检测出病原菌,随感染时间延长含量逐渐升高,菌量介于1.9×101~4.7×102 CFU·mg-1之间,脑中未检出病原菌。qPCR检测结果与组织损伤进程基本一致,表明拟态弧菌首先粘附于黄颡鱼肠道,皮肤肌肉和鳃,同时可侵染多数内脏器官,但主要于皮肤肌肉内进行繁殖。免疫组织化学法对皮肤肌肉中的细菌进一步定位发现,病原菌主要分布于皮下疏松结缔组织层与骨骼肌肌纤维上。
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