基于液相色谱质谱/气相色谱质谱技术的系统性红斑狼疮患者血浆代谢组学研究

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目的:系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的发病机制目前尚未完全明确,在既往研究中通常是使用单一技术进行代谢组学研究,且样本量较小。本研究同时使用液相色谱质谱技术(LC-MS)与气相色谱质谱技术(GC-MS)两种代谢组学技术对SLE患者与健康人群对照组的血浆样本进行差异代谢物分析,为改善系统性红斑狼疮的诊断及治疗提供理论依据。方法:1.采集从2017年8月至2018年5月西部战区总医院肾脏及风湿免疫科住院确诊的50例SLE患者及我院体检中心中招募的50例健康志愿者的血浆样本。2.针对采集样本展开代谢组学检测,主要方法为液相色谱质谱技术(LC-MS)与气相色谱质谱技术(GC-MS),获得所有样本的全局代谢谱。3.对于各代谢物相关系数等参数的确定,主要通过多维分析(无监督主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA))和单维分析(t检验(student’s t test)和变异倍数分析(fold change analysis))方法来实现,之后综合各项参数,结合相应的文献及SLE发病机制,选择出两组之间意义最大的差异代谢物。4.将差异代谢物在KEGG数据中进行检索,对所涉及的代谢通路进行分析,最终绘制出差异性代谢物的相关代谢通路图。结果:通过LC-MS/GC-MS两种技术分别对SLE组和对照组血浆样本进行检测,随后获得全局代谢谱,对相应代谢物进行标定。结合SLE的发病机制,使用多维分析方法,选择出了VIP值>1,并且P<0.05的11种差异代谢物作为SLE潜在的诊断性标志物:即缬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、色氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、甘油酸、亚油酸以及酪氨酸。结合相关文献查阅,这些代谢物主要与糖代谢、脂肪酸代谢、氨基酸代谢、氧化应激、以及情绪异常等相关。之后完成了代谢通路图的绘制,以呈现出这些关键代谢物之间的关联性。结论:在本次研究中,我们对SLE组及健康对照组共100例血浆样本使用LCMS/GC-MS技术进行代谢组学研究,并最终推断糖代谢、脂肪酸代谢、氨基酸代谢等代谢通路在SLE患者体内发生紊乱,以及SLE患者发生氧化应激、情绪异常等变化可能与这些代谢物的异常相关。而对这些代谢通路或生理功能中起关键作用的差异代谢物的研究可以为以后SLE患者提供新的诊疗思路。
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