传统的抗氧化活性研究方法以分光光度法、荧光光度法和化学发光法为主，但传统的分光光度法存在着灵敏度不高、供试样品消耗量大，可靠性差，对于植物活性成分，还存在着光谱干扰等问题。荧光光度法和化学发光法灵敏度高但所用到的仪器昂贵，分析成本较高，目前还难以普及。液相色谱法和电化学方法具有灵敏度高、可靠性高、样品用量少等优点，可避免有色物质干扰，在抗氧化活性研究中已展现出良好的应用前景。本文针对传统抗氧化活性研究方法的不足，以植物多酚为研究对象，研究了植物多酚清除DPPH自由基的光谱、电化学和液相色谱特征，建立植物多酚清除DPPH自由基活性的光谱、液相色谱和电化学新方法，并应用于藏族药诃子抗氧化活性的研究。主要研究内容和结果如下：（1）植物多酚的HPLC分析和清除DPPH自由基活性成分研究以AB-8型大孔吸附树脂对诃子多酚进行分离纯化，经提纯后的诃子精多酚进行HPLC分析检测，建立了HPLC法同时测定诃子中四种主要酚酸化合物没食子酸，香草酸，咖啡酸和对香豆酸含量的方法。色谱条件：流动相A：甲醇；流动相B：乙酸/水（1.0%，v/v）为流动相，室温条件下采用梯度洗脱法：0^-10min （5%A），10-25min （10%A），25-26min （50%A），26-35min （80%A），35-35.1min （100%A）。流速：1.00mL·min^-1。进样量：20μL；紫外检测器检测波长：280nm。诃子中没食子酸，香草酸，咖啡酸和对香豆酸的含量分别为1.22mg·g^-1，0.78mg·g^-1，0.13mg·g^-1，1.11mg·g^-1。在诃子精多酚中加入DPPH自由基，通过HPLC-DPPH法研究诃子中对DPPH自由基具有清除作用的活性成分。结果显示：诃子中存在12种对DPPH自由基具有清除作用的活性成分，清除活性最强的是没食子酸，其次是咖啡酸，对香豆酸和香草酸等成分对DPPH自由基的清除能力相对较弱。（2）植物多酚清除DPPH自由基活性的HPLC分析法研究建立了植物多酚清除DPPH自由基活性的HPLC分析法，色谱条件：流动相A（甲醇）与B（H2O）的比例为50:50，柱温：25℃，流速：1.00mL·min^-1。在3d内，每天测定6次，测定峰面积和保留时间的RSD（相对标准偏差）<4%。采用建立的方法，对没食子酸，咖啡酸，对香豆酸和香草酸清除DPPH自由基活性进行了研究，测定了四种样品清除DPPH自由基的相关线性方程。采用高效液相色谱法测定了4种植物多酚的DPPH自由基清除活性，获得了DPPH自由基清除率与植物多酚浓度的线性方程，据此计算出50%清除率的植物多酚浓度（IC50）和方程的斜率进行评估。4种植物多酚的抗氧化活性顺序为没食子酸>咖啡酸>香草酸>对香豆酸。（3）植物多酚与DPPH自由基反应的光谱特征及微量光谱滴定法研究采用分光光度计法研究了没食子酸，香草酸，咖啡酸和对香豆酸4种植物多酚与DPPH自由基反应的光谱特征，DPPH稳定时间为1h，达到最大清除的时间：没食子酸（10min）﹤咖啡酸（20min）﹤香草酸（30min）﹤对香豆酸（35min）。没食子酸和咖啡酸能有效、快速的清除DPPH自由基。研究发现，诃子多酚提取物具有良好的清除DPPH自由基活性，没食子酸和咖啡酸是其清除DPPH自由基的主要活性物质。在对植物多酚与DPPH自由基反应的光谱研究基础上，发展了植物多酚清除DPPH自由基的微量光谱滴定法。测定了没食子酸、咖啡酸、香草酸和对香豆酸对不同浓度DPPH清除作用的光谱滴定曲线，获得了4种植物多酚与DPPH反应的化学计量比分别为：1:3，1:2，1:0.0015，1:0.0004。误差分析表明，光谱滴定法的误差与DPPH浓度及植物多酚清除自由基的能力有关，植物多酚清除能力越强，则RSD越小。对于没食子酸和咖啡酸，高浓度(0.007mg·mL^-1)和中浓度(0.004mg·mL^-1)RSD值小于2%。但低浓度(0.002mg·mL^-1)时，4种酚酸的测量误差都明显增加。（4）植物多酚电化学氧化机理与清除DPPH自由基的电化学滴定法研究在对没食子酸（GA）和咖啡酸（CA）的电化学氧化机理研究的基础上提出一种新型微量电化学滴定分析方法，使用差分脉冲伏安法（DPV）电化学分析方法，测定了电化学滴定曲线，根据电化学滴定曲线计算没食子酸，咖啡酸与DPPH反应的化学计量关系。实验结果表明，没食子酸和咖啡酸与DPPH自由基反应的化学计量关系分别为1:2和1:3。