【摘 要】
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14-3-3蛋白是一类普遍存在于所有真核生物细胞且高度保守的多功能分子伴侣蛋白。它参与细胞许多重要的生理过程,并起着至关重要的作用,近年来研究表明14-3-3蛋白在玉米胚乳中可能与淀粉代谢相关蛋白发生相互作用,进而调控玉米淀粉合成。本研究中我们根据GeneBank上玉米GF14-12 CDs（M96856）序列设计一对引物,扩增出编码玉米胚乳GF14-12基因的全长编码cDNA序列,并成功的构建了
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14-3-3蛋白是一类普遍存在于所有真核生物细胞且高度保守的多功能分子伴侣蛋白。它参与细胞许多重要的生理过程,并起着至关重要的作用,近年来研究表明14-3-3蛋白在玉米胚乳中可能与淀粉代谢相关蛋白发生相互作用,进而调控玉米淀粉合成。本研究中我们根据GeneBank上玉米GF14-12 CDs（M96856）序列设计一对引物,扩增出编码玉米胚乳GF14-12基因的全长编码cDNA序列,并成功的构建了玉米14-3-3蛋白家族成员中GF14-12的大肠杆菌原核表达载体pET15b::GF14-12和酵母双杂交诱饵载体pGBKT7::GF14-12。利用lmM IPTG诱导大肠杆菌表达外源基因GF14-12,亲和层析纯化获得蛋白。为进一步制备玉米14-3-3蛋白抗体制备提供了较好的原材料。利用酵母双杂交技术从玉米胚乳中初步筛选出2个与GF14-12发生互作的蛋白质。分别为Tim17 family家族成员和Aux/IAA family家族成员IAA6。表明玉米胚乳中确实存在与14-3-3蛋白发生相互作用的蛋白因子。
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