美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎临床疗效观察及核因子-κB在其治疗中的意义

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目的:探讨美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎的疗效及NF-kB在其治疗中的意义.方法:41例溃疡性结肠炎患者,年龄18~75岁,其中男23例,女18例,随机分为两组,试验组患者服用美沙拉嗪缓释颗粒,由法国爱的发制药集团生产,博福-益普生制药公司销售,剂量为1.0g/次,一日4次,疗程8周;对照组服用SASP,由上海福达制药有限公司生产,剂量为1.0g/次,一日4次,疗程8周。治疗前及治疗8周后观察临床症状、肠镜检查及组织学检查,随访实验室检查项目,详细记录治疗期间出现的任何不良反应,比较两组数据是否有统计学差异。41例患者采用自身前后对照,每例患者分别于用药前后自病变部位各取10块活检组织,并立即储存在液氮中备用,检测NF-κBDNA结合活性,观察美沙拉嗪及SASP对其有无影响。细胞质及细胞核蛋白的提取参照Screiber等[1]的方法进行,用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,-70℃保存备用。凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA):NF-κB寡核苷酸探针序列为:5ˊ-CAGAGGGACTTTCCGAGA-3ˊ(上海生物工程公司合成)。用T4多核苷酸激酶法将r-32 P ATP(北京亚辉<WP=26>生物工程公司)标记在该探针上。参照Rogler等[2]的方法,取5μg核蛋白与标记探针2u l在20ulEMSA缓冲液[12mmol/L羟乙基哌嗪(HEPES),pH7.9,4mmol Tris-HCL,pH7.9,25mmol/LKCL,5mmolL/LMgCL2,1mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),1mmol二硫苏糖醇(DTT),50ng/mlpoly[(d-I)(d-C)],,12%甘油和0.2mmol/L苯甲磺酰氟(PMSF)中孵育30min后,行非变性聚丙烯酰胺凝胶(丙烯酰胺∶双丙烯酰胺=29∶1)电泳,-70℃放射自显影后,用凝胶成像分析系统(英国UVItec公司)对NF-κB与标记探针结合的相对量进行密度分析,以相对光密度(RA)×面积(mm2)表示。结果:美沙拉嗪治疗组在临床症状改善、内镜检查及组织学改变方面均优于SASP治疗组,两组资料经统计学检验,差异有显著性(P<0.05)。两组患者副反应评价无统计学差异。采用EMSA分析发现,未用过药物治疗的UC患者,其NF-κBDNA结合活性明显高于用药组。使用药物治疗后,其NF-κBDNA 结合活性明显降低,与治疗前相比,有统计学差异(P<0.05)。结论:SASP及美沙拉嗪为治疗溃疡性结肠炎(UC)的一线药物,与SASP相比,美沙拉嗪疗效较佳,起效较快,不良反应少,是治疗UC安全有效的药物,前景看好。 UC病因和发病机制仍不清楚,大多数研究认为与免疫反应的异常特别是肠粘膜局部免疫反应的紊乱有关,NF-κB可调节<WP=27>细胞因子释放,促进炎症反应,导致粘膜损伤,在其发病中起着十分重要的作用。从NF-κB角度寻找治疗UC的新策略和新药物是当今胃肠病学领域研究的热点。 SASP及5-氨基水杨酸抗炎作用与干扰前列腺素的合成以及抑制Cox-2基因有关,同时也通过抑制NF-kB的活性而达到抗炎治疗效果。
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