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目的:1.车前子胶的制备优选最佳工艺提取车前子胶,并通过一系列除杂方式精制车前子胶粗品。2.车前子胶质量标准建立柱前衍生化高效液相色谱法和紫外分光光度法来测定车前子胶中多糖含量及单糖组成情况。并将该方法应用到系统适应性实验中,以考察其精密度、稳定性等。3.车前子胶对小鼠免疫功能的研究探究车前子胶对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响。材料与方法:材料:样品为车前子药材(批号:140606),产自江西省,购于定州医药有限公司康瑞批发部。方法:1.车前子胶的制备采用水提取乙醇沉淀工艺提取车前子胶,并通过Sevage法除蛋白,过氧化氢脱色,丙酮等有机溶剂洗涤等方式精制车前子胶粗品。2.车前子胶质量标准通过PMP柱前衍生化以及水解等对车前子胶样品进行处理后,采用Agilent C18 HPLC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为245 nm,流动相为0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液(Na H2PO4-Na2HPO4,PH 6.7)(A)-乙腈(B),利用高效液相色谱法进行单糖组成分析及含量测定。3.车前子胶对小鼠免疫功能的影响选用腹腔注射方式,向小鼠体内注射环磷酰胺注射液,将其造模成免疫功能低下的小鼠,以车前子胶高、中、低剂量(900/300/100 mg·kg-1)灌胃给药21天,通过检测小鼠校正碳粒廓清指数、足趾厚度差、体重增长率、脾脏指数、胸腺指数和半数溶血值等指标,观察其对免疫功能的影响。结果:1.经12、10、8倍量水提取3次,再加等量乙醇浸泡2次后得土灰色纤维状车前子胶粗品,精制后所得车前子胶为白色细粉状。2.车前子胶的水解产物是一种由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等组成的酸性多糖,其单糖组分的含量在1.63691.19 mg·g-1之间,且方法学验证结果良好,结果全部符合标准。3.车前子胶可以显著提高小鼠迟发型变态反应强度,可使免疫功能低下小鼠的溶血素水平显著升高,明显增强小鼠碳粒廓清功能,且对体重、脾指数和胸腺指数均有增加的作用。结论:车前子胶经最佳工艺提取并精制后,其得率为32.21%。通过对车前子胶单糖组成、总糖含量、水分等的分析,建立初步的质量标准。通过对小鼠校正碳粒廓清指数等指标进行实验,证实了车前子胶具有一定的增强免疫功能的作用。